[发明专利]一种食品中降红木素的定性定量检测方法

说明书

本发明公开了一种食品中降红木素的定性定量检测方法，用5%醋酸乙腈溶液均质提取样品中的降红木素，提取液经十八烷基硅烷键合相（C18）和弗罗里硅土（Florisil）基质分散净化后，提取液注入超高效液相色谱‑四级杆‑飞行时间/质谱仪（UPLC‑Q‑TOF/MS）测定。进行一级、二级扫描并与建立的数据谱库比较，经确证含有降红木素的样品再进行定量，采用不含待测降红木素的空白基质溶液建立校正的标准曲线，外标法定量。本方法平均回收率为82.5%~104.5%，相对标准偏差(RSD)小于7.6％，检出限为0.5 mg/kg；具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点。将为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。

技术领域

本发明涉及一种食品中降红木素的定性定量检测方法，属于食品添加剂的测定技术领域。

背景技术

降红木素是从原产于中南美洲的红木种籽假种皮中提取的一种食用天然色素，是用碱液浸泡提取得到。早在一百多年前，降红木素已被美、欧等国作为食品色素使用，广泛用于甜点、冰淇淋、奶酪等。日本也于1986年将其列为法定的食品色素。我国在2008年也批准降红木素作为食品添加剂使用，我国《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》(GB2760-2014)中对降红木素的最大限量规定为：

目前，有关食品中红木素含量检测方法的报道均采用液相色谱法，如国外Noppe等采用液相色谱法检测肉制品中的红木素和降红木素，采用乙腈直接提取肉中色素，二极管阵列456、486nm检测，定量限为0.5mg/kg，线性范围为0.5-10mg/kg；国内林钦等采用酸化乙腈溶液提取，经乙腈饱和正己烷净化后注入超高效液相色谱仪检测，检测限为0.1mg/kg。高效液相色谱由于其检测器的通用性，杂质干扰严重，无法阐明化合物的结构裂解信息，定性差，容易产生假阳性或假阴性的结果。

超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)，是一种高分辨质谱，可对化合物进行精确分子质量的测定，并依据所测得的化合物的精确分子质量对其进行确证分析，同时在碰撞诱导解离(CID)模式下，得到化合物及其碎片离子的分子式和精确分子质量，可进一步对化合物的结构和裂解规律加以确证，定性准确度很高。目前，未见此方法应用于食品中红木素含量的检测。

QuEChERS(Quick Easy Cheap EffectiveRugged and Safe的简称)是近年来发展起来的一种快速、环保、经济的前处理方法，可以有效的去除提取溶液中的干扰杂质，未见用于红木素等食品添加剂的检测分析。

目前，关于采用QuEChERS方法进行样品前处理，同时结合UPLC-Q-TOF/MS测定食品中红木素的检测方法未见报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种食品中降红木素的定性定量检测方法。

为实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：

一种食品中降红木素的定性定量检测方法，包括如下步骤：

a、色素提取：取样品先用醋酸乙腈溶液均质提取，然后用无水硫酸钠和氯化钠水平振荡提取，离心，得上清液；

b、净化：向上清液中加入C18和Florisil吸附剂振荡混合，冷冻离心，静置，旋转蒸发、氮吹干，定容后滤膜过滤，得净化后样液；

c、标准溶液配制：将不含降红木素的同种类基质空白样品按上述步骤a和b处理后，得样品提取净化液，加入标准溶液，涡旋混匀，配制成不同浓度的降红木素标准工作液；