[发明专利]石油催化菌的筛选方法

权利要求书

1.一种石油催化菌的筛选方法，其特征在于，包括：

将有机氮源、缓冲盐、表面活性剂和固体凝胶在水中混合，得到水溶液，所述水溶液的初始pH为6.0～8.0；

将所述水溶液高温灭菌后与石油烃混合，得到液态培养基；

将所述液态培养基与含石油催化菌的微生物原液混合后冷却，得到固态培养基；

培养所述固态培养基至出现肉眼可见的菌落后，加入pH指示剂溶液，若所述菌落周围的固态培养基变色，则所述菌落为能够代谢石油并产生酸性物质的石油催化菌。

2.根据权利要求1所述的石油催化菌的筛选方法，其特征在于，所述有机氮源包括蛋白胨、酵母粉、酵母浸出粉中的一种或几种，且在水溶液中的总浓度共计为0.1g/L～10g/L。

3.根据权利要求1所述的石油催化菌的筛选方法，其特征在于，所述缓冲盐的pH为6.0～8.0，包含磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠中的一种或几种，且在水溶液中的总浓度共计为5mM～100mM的磷酸根。

4.根据权利要求1所述的石油催化菌的筛选方法，其特征在于，所述表面活性剂包括Tween-20、Tween-60、Tween-80、辛基酚聚氧乙烯醚-100、辛基酚聚氧乙烯醚-45、槐糖脂、鼠李糖脂、快速渗透剂T琥珀酸二辛酯磺酸钠、十二烷基磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠、月桂醇醚磷酸酯钾、乙氧基化烷基硫酸钠、烷基酚聚氧乙烯醚、高碳脂肪醇聚氧乙烯醚AEO、脂肪酸聚氧乙烯酯、脂肪酸甲酯乙氧基化物、聚醚型非离子表面活性剂中的一种或几种，且在水溶液中的中的最终浓度为0.2g/L～10g/L。

5.根据权利要求1所述的石油催化菌的筛选方法，其特征在于，所述固体凝胶包括琼脂、卡拉胶、阿拉伯胶、黄原胶中的一种或几种，且在水溶液中的总浓度共计为2g/L～20g/L。

6.根据权利要求1所述的石油催化菌的筛选方法，其特征在于，所述石油烃包括原油、汽油、柴油、航空煤油的一种或几种，且与水溶液的体积比为0.001～0.050:1。

7.根据权利要求1所述的石油催化菌的筛选方法，其特征在于，所述水溶液高温灭菌后降到35℃～55℃时再与石油烃混合，以得到所述液态培养基。

8.根据权利要求1所述的石油催化菌的筛选方法，其特征在于，pH指示剂的变色范围为3.0～5.0，包括甲基橙、甲基黄、甲基红、刚果红、溴酚蓝、溴甲酚绿中的一种或几种。