[发明专利]一种水稻中丙硫唑残留量的检测方法

权利要求书

1.一种水稻中丙硫唑残留量的检测方法,其特征在于包括以下步骤：

步骤一、样品预处理

水稻秸杆样品：剪碎为长度为1cm左右的小段；

糙米和稻壳样品：用砻谷机将糙米和稻壳分开，糙米和稻壳分别经植物粉碎机粉碎并过20目筛，盛装在洁净的封口塑料袋中；

步骤二、准确称取步骤一预处理好的糙米、稻壳或水稻秸杆样品置于容器中，加入质量浓度1％的冰乙酸乙腈使其淹没稻米、稻壳或水稻秸杆样品，在30℃～35℃下振荡提取30min～60min，之后经小漏斗过滤，滤液经NaCl盐析，剧烈震荡后静置分层，吸取提取液一半的有机相上清液，转入250mL磨口三角瓶中，在旋转蒸发仪上45℃浓缩至近干，得提取浓缩液；

步骤三、将制备的提取浓缩液过弗罗里硅土层析柱净化，弗罗里硅土层析柱从下至上依次装填有脱脂棉、2cm厚无水硫酸钠、5g弗罗里硅土和2cm厚无水硫酸钠；在弗罗里硅土层析柱装填好后，先用15mL甲醇预淋洗，弃去预淋洗液；再将上述提取浓缩液全部移入弗罗里硅土层析柱中，用10mL甲醇淋洗，收集全部淋洗液转入250mL具塞三角瓶中，在旋转蒸发仪上45℃浓缩至近干，再用色谱甲醇定容至5.0mL，过0.45μm微孔滤膜，形成待测样品溶液；

步骤四、选定HPLC色谱条件为：高效液相色谱仪为带紫外检测器的高效液相色谱仪，色谱柱长度为250mm×4.6mm，粒径为5u的ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈色谱柱，柱温为35℃，流速为0.6mL/min，进样量为20uL，流动相为甲醇和水溶液组成的混合溶液，甲醇和水溶液的体积比为72：28，波长为245nm；

步骤五、准确称取丙硫唑标准品，用色谱甲醇溶解配制成标准母液，然后采用梯度稀释法分别取丙硫唑标准母液配制成丙硫唑的标准工作溶液，配制成的丙硫唑标准工作溶液的丙硫唑质量浓度为0.05、0.10、0.50、1.00、5.00mg/L，并分别注入高效液相色谱仪，同时满足步骤四的HPLC色谱条件进行测定，分别以丙硫唑的质量浓度x为横坐标、相应的色谱峰面积y为纵坐标绘制丙硫唑的标准工作曲线，进而得到丙硫唑的标准曲线方程y＝94.713x+0.4029，其相关系数R²＝1；

步骤六、将歩骤三制得的待测样品溶液注入到步骤四选定的高效液相色谱仪中，并按照步骤四的色谱条件进行检测，将测得的色谱峰面积代入到步骤五中的标准曲线方程中，即得样品中丙硫唑的质量浓度。