[发明专利]西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201910963139.9 申请日: 2019-10-11
公开(公告)号: CN110790818B 公开(公告)日: 2021-06-01
发明(设计)人: 党亚丽;高新昌;周亭屹;郝丽 申请(专利权)人: 宁波大学
主分类号: C07K7/06 分类号: C07K7/06;C07K5/103;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C12P21/06;A23L33/18;A61K38/08;A61K38/07;A61P9/12
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 陈升华
地址: 315211 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 兰花 蛋白 来源 ace dpp iv 抑制 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽,其特征在于,其氨基酸序列分别为以下五种:

肽1:Leu-Pro-Gly-Val-Leu-Pro-Val-Ala;

肽2:Tyr-Leu-Tyr-Ser-Pro-Ala-Tyr;

肽3:Leu-Pro-Gly-Val-Leu-Pro;

肽4:Val-Pro-Leu-Val-Met;

肽6:Tyr-Leu-Tyr-Ser-Pro-Ala。

2.根据权利要求1所述的西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)以西兰花新鲜茎叶为原料进行压榨,将所得汁液加热到80℃~99℃,保温5~20min,沉淀物经离心,干燥,即得西兰花蛋白粗提物;

(2)以西兰花蛋白粗提物为原料,按料液质量比1:15~30加入蒸馏水,在温度55~65℃、pH7.5~8.5条件下,加入西兰花蛋白粗提物质量1.0~5.0%的碱性蛋白酶,酶解2~5h后,灭酶,冷却,并经离心,旋转蒸发,浓缩后冷冻干燥,得到西兰花多肽提取物;

(3)将西兰花多肽提取物采用超滤,然后用凝胶柱分离,洗脱条件为:洗脱液为去离子水,流速10~25mL/h,收集三个西兰花小肽分离组分,经过滤,干燥测定ACE抑制活性;

(4)将步骤(3)得到的ACE抑制活性最强的组分,进一步进行液相分离,收集四个西兰花小肽分离组分;

(5)采用质谱对液相分离得到的峰进行分析,鉴定活性肽的结构,得到西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽。

3.根据权利要求2所述的西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽的制备方法,步骤(1)中,将所得汁液加热到85℃~95℃,保温8~15min。

4.根据权利要求2所述的西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽的制备方法,步骤(2)中,以西兰花蛋白粗提物为原料,按料液质量比1:18~25加入蒸馏水,在温度58~62℃、pH7.8~8.2条件下,加入西兰花蛋白粗提物质量1.5~3.0%的碱性蛋白酶,酶解2.5~4h后,灭酶,冷却,并经离心,旋转蒸发,浓缩后冷冻干燥,得到西兰花多肽提取物。

5.根据权利要求2所述的西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽的制备方法,步骤(3)中,所述的流速为13~18mL/h。

6.根据权利要求2所述的西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽的制备方法,步骤(4)中,所述的液相分离的色谱条件:柱温25℃~35℃,流动相A采用甲酸水溶液,该甲酸水溶液由水中加入体积分数0.1~0.3%甲酸后制备得到,流动相B采用乙腈,洗脱方式为梯度洗脱,流速0.8~1.2 ml/min,检测波长:270~290nm。

7.根据权利要求1所述的西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽在制备辅助降血压食品中的应用。

8.根据权利要求1所述的西兰花蛋白来源的ACE和DPP-IV抑制肽在制备降压药品中的应用。

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