[发明专利]一种快速鉴定斑石鲷和金钱鱼的方法有效
| 申请号： | 201910963922.5 | 申请日： | 2019-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN110607375B | 公开（公告）日： | 2022-12-23 |
| 发明（设计）人： | 祝斐;吴国均;张曹进;陈淑吟;贾超峰;孟乾;张志伟;高波;孙瑞建;沙士兵;於明伟;陈自强;曾海峰;林士杰 | 申请（专利权）人： | 江苏省海洋水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所(普通合伙) 31233 | 代理人： | 黄志达;魏峯 |
| 地址： | 226007 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 鉴定 斑石鲷 金钱 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种快速鉴定斑石鲷和金钱鱼的方法，包括：
（1）提取斑石鲷和金钱鱼样品的基因组DNA；
（2）采用特异性引物进行PCR扩增；
其中，引物序列为：
上游引物：5'- CGCTTTATGTATCTCGCTGCT-3'；
下游引物：5'- CTCTGTAGGTTTCCAGTTGTATTTTC-3'；
（3）PCR扩增产物经凝胶电泳后拍照记录比对电泳结果，在160bp处有一条清晰的特异性鉴别条带为斑石鲷，在200bp处有一条清晰的特异性鉴别条带为金钱鱼。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中的PCR扩增体系为：总体积25μL，2.5μL 10×PCR buffer，0.5μL dNTP，2.5μL Mg2+，1μL DNA模板，上下游引物各1μL，0.25μL Taq DNA聚合酶，用灭菌双蒸馏水补足体积。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中的PCR扩增条件为：94℃预变性5min，94℃30s，55℃35s，72℃1min，35个循环，最后55℃延伸35s。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中凝胶电泳为2.2%琼脂糖凝胶电泳；电泳缓冲液为1× TAE，电压不超过5V/cm，电泳时间30-60min，取3μL PCR扩增产物用琼脂糖凝胶电泳检测。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏省海洋水产研究所，未经江苏省海洋水产研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910963922.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
