[发明专利]一种基于抗肝癌生物活性的复方木鸡颗粒质量控制与评价方法

说明书

本发明属于中成药质量控制与评价技术领域，该方法以生物效价作为评价指标；具体地，是以抗肝癌的生物效价作为复方木鸡颗粒的评价指标。其中，抗肝癌的生物效价是指抑制肝癌细胞增殖的生物效价。本发明所述复方木鸡颗粒质量控制与评价方法操作简单，稳定性高，灵敏可靠，可以作为复方木鸡颗粒理化检测的有效补充，可控制其整体质量并综合评价其整体效应，还可用于评价其他抗肝癌药品之间活性的强弱。

发明领域

本发明属于中成药质量控制与评价技术领域，特别涉及一种基于生物活性测定的中成药质量控制与评价方法，更特别的是，涉及复方木鸡颗粒的生物质量控制与评价方法。

背景技术

相比化学药物而言，中成药成分复杂，其质量标准的现代化与国际化一直是困扰中药发展的核心，而建立建立科学、可靠的质量控制与评价方法是完善的质量标准的关键。现阶段中成药质量的控制与评价以化学成分的定性定量分析为主要手段。随着中药研究的不断深入，这种模式在中成药质量控制和评价体系中逐渐显现出了局限性。以个别或部分指标性成分的含量作为质量标准的一项指标，虽然可以控制指标性成分的含量，但也仅是控制了其中的某一或某些成分的含量，难以保证所有成分的稳定性和临床疗效的一致性，更难以体现中成药的整体生物效应。生物活性测定法作为一种基于生物活性测定的质量分析手段，其有望成为一种真正符合中医药传统理论、体现中成药临床应用特点、保证中成药安全有效的质量控制与评价方法。

复方木鸡颗粒是在“木鸡汤”基础上发展而来的，由云芝，菟丝子，山豆根，核桃楸皮四味中药组成，自1985年问世以来，因其能够特异性地抑制甲胎蛋白(AFP)升高，在临床中广泛应用，主要用于肝炎，肝硬化，肝癌的治疗，其疗效显著；然而，历版的《中国药典》尚未收载复方木鸡颗粒，其被收载于《卫生部药品标准》(中药成方制剂第十六册)中，经碱性酒石酸铜试液、三氯化铁试液和碘化汞钾试液进行理化实验鉴别；其被收载于《国家食品药品监督管理局国家药品标准》中，以苦参碱为对照品进行薄层鉴别，以核桃楸皮为对照药材进行薄层鉴别；尚未建立其生物质量控制与评价方法，因此，建立一种基于生物活性的复方木鸡颗粒质量控制与评价的方法具有实际意义。

目前生物活性测定法在中成药领域的研究成果鲜见报道；目前对于中药抗肝癌药物的生物活性的测定方法，或者基于生物活性测得的抗肝癌类中药的质量评价或检测方法尚未见报道。

本发明前期针对中药成方制剂-复方木鸡颗粒申报了“一种治疗肝硬化、肝炎、肝癌的中药及其生产方法”的专利(专利号：CN02144684.9)，保护了它的制备工艺，和“一种复方木鸡颗粒质量控制的方法”的专利(专利号：2017100849106)，保护了它的有机成分的质量控制方法；在此基础上，本发明构建一种基于生物活性的复方木鸡颗粒的质量控制与评价方法，该方法可控制复方木鸡颗粒抗肝癌的整体质量并综合评价其整体效应，并且该方法还可用于评价其他抗肝癌药品之间活性的强弱。

发明内容

为了解决现有技术中存在的不足，本发明提供一种基于生物活性的复方木鸡颗粒质量控制与评价的方法，其以生物活性作为质量评价指标。该方法体现复方木鸡颗粒抗肝癌的整体效应，与临床用药的有效性直接关联，而且还能比较其他抗癌药品之间抗肝癌活性强弱。

为实现上述目的，采用的技术方案是：

一种基于抗肝癌生物活性的复方木鸡颗粒质量控制与评价方法，其特征在于，包括下述步骤：

(1)对照品溶液的制备

取紫杉醇/乙醇溶液溶于DMEM完全培养液，配制成含紫杉醇培养液，微孔过滤，得对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备

取复方木鸡颗粒加入到50％乙醇中，超声处理后冷却，过滤并挥干溶剂，得浸膏，计算出膏率；取浸膏溶于DMEM完全培养液，配制成含药培养液，微孔过滤，得供试品溶液；

(3)抑制率的测定