[发明专利]一种基于阴离子聚合物及其衍生物制备的疫苗载体

说明书

本发明提供一种基于阴离子聚合物及其衍生物制备的疫苗载体，并提供其制备方法。纳米粒通过一系列阴离子聚合物及其衍生物与铝盐复合形成氢氧化铝，在制备的过程中加入不同的抗原成分可将抗原包载。制备的疫苗可以高效地被抗原呈递细胞摄取，传递到淋巴结并诱导抗原特异性的免疫反应，具有广阔的疫苗应用前景。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种基于阴离子聚合物及其衍生物材料的疫苗载体及其制备方法。

背景技术

疫苗接种是现代医学的伟大胜利之一，也是大多数疾病预防和根除的有效手段，用于控制多种感染性疾病甚至根除了天花。一般疫苗主要是减毒或灭活疫苗，免疫原性高但安全性低。而现在的研究主要集中于亚单位疫苗，因为其更纯净安全。但是相比减毒疫苗，安全性的提高伴随着免疫原性的降低。因此，佐剂成为疫苗中至关重要的组分，用以提升亚单位疫苗持久有效的免疫效应。使用疫苗递送载体，能够诱导有效的免疫响应和提供改善的稳定性,安全性和成本和有效性。在过去十年中，纳米级(1000 nm)材料，如病毒样颗粒、脂质体、ISCOMS、聚合物和不可降解的纳米球，纳米粒等，作为疫苗抗原的递送载体而受到人们的关注，这种载体既可以稳定疫苗抗原，避免抗原的降解，其本身也有一定的佐剂效果，可以提高帮助抗原实现其免疫反应。

疫苗递送载体的大小会影响其分布并最终影响抗原应答。当由肌肉注射或皮下注射途径，大小为20–100 nm的粒子可穿过细胞外基质，直接进入淋巴管。而更大粒径的粒子一般被皮下的DC细胞摄取再迁移到淋巴结。后者的速度和递送抗原量远远低于前者。通过设计纳米粒的性质，可以使纳米粒直接靶向到淋巴结，被大量的免疫细胞（如DC细胞）所捕获，从而产生有效的免疫应答。

铝佐剂自从1926 年被成功地使用，可安全地给药，产生强大的免疫，因而用于多种人用疫苗。然而它不能刺激细胞内免疫反应，不能诱导Th1型免疫反应，且存在潜在的局部不良反应和超敏反应的危险，质量难控制且对佐剂的效果很难做出准确的评价。虽然铝佐剂无法有效诱导 Th1 型应答的特点限制了其应用范围，但其用于人体的安全有效性是被时间验证了的，因此我们认为构建氢氧化铝为核心的疫苗载体将会非常有潜力。

随着纳米技术的不断发展和进步，我们也将目光也投向了铝佐剂，将铝佐剂制备成纳米颗粒后，其粒径更小，比表面积急剧增大，具有表面反应，活性高、活性中心多、吸附能力强等特性，在相同铝含量的情况下，可吸附更多的抗原。

因此存在将氢氧化铝通过加入一定材料限制其聚集生长，从而制备成纳米级别颗粒用于疫苗递送的需要。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种基于阴离子聚合物及其衍生物制备的疫苗载体。本发明通过一系列阴离子聚合物及其衍生物与铝盐复合形成氢氧化铝纳米粒，在制备的过程中加入不同的抗原成分可将抗原包载。制备的疫苗可以高效地被抗原呈递细胞摄取，传递到淋巴结并诱导抗原特异性的免疫反应。

氢氧化铝是一种两性化合物，其在 pH6~10 之间生成不溶于水的白色沉淀。现有技术中，通常使用高温煅烧、水热反应、反相微乳法等方法制备纳米级氢氧化铝，其反应条件剧烈，而且过程复杂繁琐，制得纳米级别的氢氧化铝易团聚，分散性能差，稳定性差，不适合于临床使用。本发明利用硫酸铝能在碱性条件生成氢氧化铝的特点，同时利用氢氧化铝带正电荷和阴离子聚合物材料带负电的特性，加入阴离子聚合物材料，使其与氢氧化铝之间通过静电作用，有效地限制氢氧化铝沉淀的聚集生长，从而制备稳定性好、易于分散的纳米级的氢氧化铝。在此制备过程中，阴离子聚合物材料是纳米氢氧化铝生成的关键。

本发明的目的之一是提供一种基于阴离子聚合物及其衍生物制备的疫苗载体，所述铝盐为硫酸铝，其中基于重量份计，阴离子聚合物材料：硫酸铝为0.06 ~4.8: 0.16-6.6。

术语“阴离子聚合物”,按本领域广义的理解,指每个分子包含多个阴离子基团的聚合材料或聚合物。它包括含有多个阴离子基团如羧基、硫酸根、亚硫酸根、磷酸根、亚磷酸根及其组合的天然或者内源性，半合成衍生，或者全合成的聚合物。