[发明专利]一种三七黑斑病防治用多抗霉素的发酵工艺

权利要求书

1.一种三七黑斑病防治用多抗霉素的发酵工艺，其特征在于，包括如下步骤：

（1）金色产色链霉菌选育：以三七黑斑病病原菌为指示菌，利用抑菌圈法筛选出金色产色链霉菌；

（2）金色产色链霉菌的培养：将步骤（1）中筛选出的金色产色链霉菌菌株接种于培养基进行培养后，26-28℃培养8-10d后，选取一个生长丰满的菌落斜面，挑取一接种环菌体，接入装有种子液培养基的锥形瓶中，置于摇床中，转速控制在200±10rpm，26-28℃培养32-36h；

（3）发酵工艺：按种子液培养基与发酵培养基的体积比为10-15:100移取，接入发酵罐中进行发酵培养，发酵罐体积装液量为60-70%，控制罐压为0.03-0.05Mpa、发酵温度为26-28℃、通气比为1:0.5-0.6、搅拌转速为120-150rpm，发酵时间为30-40h；

（4）补料分批发酵工艺：在发酵过程中，还原糖浓度保持在1.0-2.0%，pH值控制在6.0-6.5，发酵培养120-140h，得到发酵液；

步骤（2）中，所述的培养基为麦芽糖AR 0.2-0.5%、酵母浸膏BR 0.3-0.5%、玉米粉IR1.0-1.5%、琼脂1.8-2.0%、蒸馏水配制的pH7.0-7.2的平板培养基；所述的种子液培养基组分为：低温黄豆饼粉1.5-2.0%、啤酒酵母粉0.4-0.6%、玉米粉1.5-2.0%、NaCl 0.1-0.3%、KH₂PO₄ 0.1-0.3%、CaCO₃ 0.3-0.5%、a-耐高温淀粉酶1000ppm，pH自然；

步骤（3）中，所述的发酵培养基组分为：低温黄豆饼粉2.0-2.5%、啤酒酵母粉0.4-0.6%、鱼粉0.3-0.5%、玉米粉6.0-8.0%、NaCl 0.3-0.5%、KH₂PO₄ 0.1-0.3%、CaCO₃ 0.3-0.5%、硫酸铵 0.5-1.0%、a-耐高温淀粉酶1000ppm、消泡剂0.01-0.05%，pH自然；

步骤（3）中，罐压控制在0.03Mpa，罐温控制在26℃；

采用定量补加饴糖，滴加浓氨水控制pH值的方法进行补料分批发酵；所述的饴糖的质量浓度为45%。

2.根据权利要求1所述的发酵工艺，其特征在于，步骤（1）中，所述的抑菌圈法为利用具盖玻璃大盘30cm×30cm的双层培养基抑菌圈法，所筛选出金色产色链霉菌为能够高效抑制三七黑斑病病原菌的多抗霉素产生菌。

3.根据权利要求1所述的发酵工艺，其特征在于，所述的硫酸铵终浓度为0.8%。