[发明专利]制备抵抗α-葡萄糖苷酶水解的交联右旋糖苷凝胶的方法

说明书

本发明提供一种制备抵抗α‑葡萄糖苷酶水解的交联右旋糖苷凝胶的方法，以低分子量右旋糖苷为起始骨架，用含有环氧基团的活化剂对其进行活化，使其带有多个环氧基团，活化的低分子量右旋糖苷；所述含有环氧基的活化剂为1,4‑丁二醇二缩水甘油醚、乙二醇二缩水甘油醚或环氧氯丙烷中的一种；利用活化的低分子量右旋糖苷作为生物交联中间体与高分子量右旋糖苷混合并进行交联反应形成水凝胶，并均质形成均一的凝胶颗粒；加入N‑乙酰‑D‑氨基葡萄糖，D‑氨基葡萄糖，以及纤维二糖功能单体。本方法所制备的凝胶，在体外交联右旋糖苷酶解的实验中，α‑葡萄糖苷酶的催化效率被降低50％以上。

技术领域

本发明涉及一种制备抵抗α-葡萄糖苷酶水解的交联右旋糖苷凝胶的方法，属于材料领域。

背景技术

右旋糖苷是一类以α-糖苷键为链接，以葡萄糖为基础功能单体的聚合多糖，由于其不具备抗原性且能够结构稳定，并能够耐受高温高压灭菌，可作为血浆扩张剂。右旋糖苷水凝胶具有较好的保水特性，且稳定性较高，在整形美容行业的注射填充领域具有较大的应用潜力。右旋糖苷被证明有效增强机体的免疫系统，抵抗微生物引起的疾病，在肿瘤、感染病和治疗创伤等方面的应用深受瞩目。此外，右旋糖苷尚有清除游离基、抗辐射、溶解胆固醇，预防高脂血症作用及抵抗滤过性病毒、真菌、细菌等引起的感染。故广泛用于医药、食品、化妆品等行业。

在人体内，α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase,EC 3.2.1.20)为一种能水解α-葡萄糖苷键的酶，可以特异性水解右旋糖苷分子中的α-1,6/1,3/1,4葡萄糖苷键，从而降解右旋糖苷分子。目前，其注射液已被用于α-葡萄糖苷酶缺乏症患者的治疗。

由于右旋糖苷具有结构稳定，无抗原性等特点，可开发温和高效的交联方法，制备交联右旋糖苷凝胶，用于整形美容行业的填充注射。此外，由于人体自身表达α-葡萄糖苷酶，能够对填充的交联右旋糖苷凝胶进行水解并逐渐使其失去塑性效果。因此，为了提高交联右旋糖苷凝胶在机体内的整体维持时间以及塑形效果，有必要考虑利用特异性的方法来抑制人体α-葡萄糖苷酶的酶解效率。目前，提高透多糖水凝胶的维持时间，仅用提高化学交联度的模式，但是化学交联剂含量的提高，可能导致后续的不良反应。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备抵抗α-葡萄糖苷酶水解的交联右旋糖苷凝胶的方法，以解决上述问题。

本发明采用了如下技术方案：

一种制备抵抗α-葡萄糖苷酶水解的交联右旋糖苷凝胶的方法，以低分子量右旋糖苷(10000-20000Da)为起始骨架，用含有环氧基团的活化剂对其进行活化，使其带有多个环氧基团，获得一种生物中间体，即活化的低分子量右旋糖苷；所述含有环氧基的活化剂为1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)、乙二醇二缩水甘油醚(EGDE)或环氧氯丙烷中的一种；利用活化的低分子量右旋糖苷作为生物交联中间体与高分子量右旋糖苷(700000-1000000Da)混合并进行交联反应形成水凝胶，并均质形成均一的凝胶颗粒；利用N-乙酰-D-氨基葡萄糖，D-氨基葡萄糖，以及纤维二糖等功能单体，抑制α-葡萄糖苷酶的催化活性，延长交联右旋糖苷凝胶的稳定时间。

该方法主要有以下步骤：

1)以低分子量右旋糖苷(10000-20000Da)为起始骨架，用含有环氧基团的活化剂对其进行活化，使其带有多个环氧基团，获得一种生物中间体，即活化的低分子量右旋糖苷；所述含有环氧基的活化剂为1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)、乙二醇二缩水甘油醚(EGDE)或环氧氯丙烷中的一种；

2)利用活化的低分子量右旋糖苷作为生物交联中间体与高分子量右旋糖苷(700000-1000000Da)混合并进行交联反应形成水凝胶，并均质形成均一的凝胶颗粒；