[发明专利]采用HPLC法筛查通宣理肺制剂中前胡投料的方法

权利要求书

1.一种采用HPLC法筛查通宣理肺丸中前胡投料的方法，该方法包括以下步骤：

(1)蜜丸样品的制备：取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，大蜜丸取约4g(水蜜丸约1g)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50mL甲醇，密塞，称定重量，超声波处理(功率500W，频率40kHz)45min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤纸过滤，得滤液A；

(2)纯化：取5mL滤液A，加在100～200目中性氧化铝柱上，用甲醇100mL洗脱，收集流出液及洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，并转移至5mL量瓶，加甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，得滤液B；

(3)检测条件：取5μL滤液B，采用Agilent ZorbaxSB-C₁₈柱，检测波长：321nm；流动相：A相为甲醇，B相为水，采用梯度洗脱，甲醇占流动相体积比为：0-14min，35％-35％；14-15min，35％-59％；15-44min，59％-59％；44-45min，59％-75％；45-55min，75％-75％；55-56min，75％-95％；56-60min，95％-95％，流速：0.5-1.0mL/min；柱温：20-40℃，以外标一点法计算供试品溶液中白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫花前胡苷的含量。

(4)筛查结果判断标准：若供试品色谱图中检出紫花前胡苷，则制剂中投了紫花前胡药材，可能是紫花前胡单一投料，也可能是非单一品种投料；若供试品中三种成分均未检出，则制剂中未投前胡、紫花前胡及其同属植物；若供试品中只检出紫花前胡苷，则制剂中只投了紫花前胡药材。

2.根据权利要求1的方法，所述步骤(3)中色谱柱为Agilent ZorbaxSB-C₁₈(150mm×4.6mm，5μm)。

3.根据权利要求1的方法，所述步骤(3)中流速为1.0mL/min。

4.根据权利要求1的方法，所述步骤(3)中柱温为35℃。

5.根据权利要求1的方法，所述筛查通宣理肺其它剂型中前胡投料的方法，该方法包括以下步骤：

①通宣理肺其它剂型样品的制备：取通宣理肺胶囊取约0.75g(片剂取约0.75g、浓缩丸取约1g、颗粒取约2g)，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50mL甲醇，密塞，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz)45min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，得滤液Ⅰ；

②检测：取5μL滤液Ⅰ，采用Agilent ZorbaxSB-C₁₈柱，检测波长：321nm；流动相：A相为甲醇，B相为水，采用梯度洗脱，甲醇占流动相体积比为：0-14min，35％-35％；14-15min，35％-59％；15-44min，59％-59％；44-45min，59％-75％；45-55min，75％-75％；55-56min，75％-95％；56-60min，95％-95％，流速：0.5-1.0mL/min；柱温：20-40℃；以外标一点法计算供试品溶液中白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫花前胡苷的含量。

③筛查结果判断标准：若供试品色谱图中检出紫花前胡苷，则制剂中投了紫花前胡药材，可能是紫花前胡单一投料，也可能是非单一品种投料；若供试品中三种成分均未检出，则制剂中未投前胡、紫花前胡及其同属植物；若供试品中只检出紫花前胡苷，则制剂中只投了紫花前胡药材。

6.根据权利要求5的方法，所述步骤②中色谱柱为Agilent ZorbaxSB-C₁₈(150mm×4.6mm，5μm)。

7.根据权利要求5的方法，所述步骤②中流速为1.0mL/min。

8.根据权利要求5的方法，所述步骤②中柱温为35℃。