[发明专利]从刺松藻中提取分离多糖的方法在审
申请号: | 201910978370.5 | 申请日: | 2019-10-15 |
公开(公告)号: | CN110724207A | 公开(公告)日: | 2020-01-24 |
发明(设计)人: | 陈荫;王腾;董喆;孙坤来;赵玉勤;王斌 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61P31/20 |
代理公司: | 33109 杭州杭诚专利事务所有限公司 | 代理人: | 尉伟敏 |
地址: | 316022 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 阴离子交换色谱柱 多糖提取 梯度洗脱 粗多糖 硫酸钠 细胞壁 预处理 脂肪酸 活性多肽 静置过夜 聚山梨酯 热水提取 提取分离 透析脱盐 乙醇洗涤 脱脂 收集器 洗脱液 烘干 抽滤 醇沉 制备 脱水 破裂 释放 | ||
1.从刺松藻中提取分离多糖的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)对刺松藻进行包括脱脂的预处理后干燥备用;
2)干燥的刺松藻用水在80-100 ℃下提取1-4 h,离心,藻渣重复提取多次,合并上清液浓缩后醇沉,3-9 ℃下静置过夜,抽滤,加入乙醇洗涤、脱水,烘干得刺松藻热水提粗多糖;
3)用强阴离子交换色谱柱分离刺松藻热水提粗多糖:以NaCl溶液梯度洗脱,部分收集器收集,将各组分洗脱液减压浓缩,透析脱盐,冷冻干燥得产物多糖。
2.根据权利要求1所述的从刺松藻中提取分离多糖的方法,其特征在于,所述步骤1)中的预处理还包括破坏细胞壁,所用试剂为脂肪酸醚硫酸钠和聚山梨酯-80的乙醇溶液,其中脂肪酸醚硫酸钠添加质量为刺松藻的0.5-2%,聚山梨酯-80添加质量为刺松藻的3-5%。
3.根据权利要求2所述的从刺松藻中提取分离多糖的方法,其特征在于,所述破坏细胞壁的过程为:将刺松藻溶于最少量的50-70 ℃的水中,加入乙醇溶液,其中乙醇溶液的体积为水的5-20%,剧烈搅拌2-3 h,离心取水相,过滤取滤饼。
4.根据权利要求1所述的从刺松藻中提取分离多糖的方法,其特征在于,所述步骤2)中提取用水的质量为刺松藻的10-30倍,洗涤用乙醇为2-5倍体积的95%乙醇,脱水用无水乙醇。
5.根据权利要求1所述的从刺松藻中提取分离多糖的方法,其特征在于,所述步骤3)中NaCl溶液梯度洗脱的浓度依次为0、0.1M、0.25M、0.5M、0.75M、1M和2M。
6.根据权利要求1或5所述的从刺松藻中提取分离多糖的方法,其特征在于,所述步骤3)中柱体积60 mL ;上样量60 mg;流速0.5 mL/min洗脱2个柱体积后以2 mL/min洗脱。
7.根据权利要求1或2或3所述的从刺松藻中提取分离多糖的方法,其特征在于,所述多糖中的单糖组成为半乳糖和阿拉伯糖,硫酸根含量为16-25%。
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