[发明专利]L-谷氨酸二乙酯盐酸盐及其光学异构体的分离检测方法

说明书

本发明公开了L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐及其光学异构体的分离检测方法，所述分离检测方法采用高效液相色谱法，固定相为硅胶类手性柱，流动相为反相溶剂：高氯酸水溶液‑乙腈。本发明所述方法具有分离度好、灵敏度高、专属性强等特点，可以快速、准确地对L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐进行质量控制。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及L-谷氨酸二乙酯盐酸盐及其光学异构体的分离检测方法。

背景技术

L-谷氨酸二乙酯盐酸盐为一种重要的医药化工原料，可用于生产雷替曲塞，培美曲塞等药物，其化学结构式如下：

L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中会有一定量的光学异构体存在，即D-谷氨酸二乙酯盐酸盐，其化学结构式如下：

该光学异构体可通过后续反应，残留至药物中，影响药品质量。因此，对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中光学异构体杂质需要进行质量控制。控制L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中光学异构体的含量，对提高药品质量、保证广大患者用药安全具有重大意义。

氨基酸类小分子光学异构体的分离检测一直是药物合成中质量控制的重点和难点。而L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的存放过程中会有少量降解杂质焦谷氨酸乙酯产生，其结构式如下：

更增加了光学异构体的分离检测难度。文献CN104515815A公开了一种L-谷氨酸二乙酯的分析检测方法，对L-谷氨酸二乙酯及其杂质分离。但该方法为有关物质检测方法，不足以对L-谷氨酸二乙酯的光学异构体分离检测。目前并无文献报道通过高效液相色谱法检测其光学异构体。

发明内容

以下是对本文详细描述的主题的概述。本概述并非是为了限制权利要求的保护范围。

本发明提供了一种灵敏、简便、快速的L-谷氨酸二乙酯盐酸盐及其光学异构体的分离检测方法，所述方法基于反相液相色谱，成熟通用、简单快速，具有分离度好、灵敏度高、专属性强等特点。

本发明提供了一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐及其光学异构体的分离检测方法，该检测方法包括以下步骤：

1)配制供试品溶液：取L-谷氨酸二乙酯盐酸盐，加水溶解并稀释制成L-谷氨酸二乙酯盐酸盐供试品溶液；

2)采用高效液相色谱法测定，精密量取L-谷氨酸二乙酯盐酸盐供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；

其中，高效液相色谱法的色谱条件包括：

流动相：高氯酸水溶液和乙腈；

色谱柱：以手性冠醚键合硅胶为固定相。

在本发明所述分离检测方法中，所述色谱条件还包括：

检测波长：200nm～230nm，优选200nm～210nm，更优选205nm；

柱温：20℃～35℃，优选25℃；

流动相的流速：0.4ml/min～1.2ml/min，优选为1.0ml/min；

进样量：10μl-30μl，优选为20μl。

在本发明的上述分离检测方法中，所述流动相中高氯酸水溶液与乙腈的体积比为2:8～8:2，优选地为(65:35)～(55:45)。

在本发明的上述分离检测方法中，所述流动相中高氯酸水溶液pH为1.0～6.0，优选地，为2.0～3.0。

在本发明的上述分离检测方法中，所述L-谷氨酸二乙酯盐酸盐供试品溶液中L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的浓度为3mg/ml～7mg/ml，优选地为6mg/ml。