[发明专利]一种共固定化酶及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种共固定化酶，其特征在于：所述共固定化酶是以海藻酸钠-CaCl₂凝胶和活性炭为载体，将过氧化氢酶和漆酶进行固定。

2.根据权利要求1所述的共固定化酶，其特征在于：所述共固定化酶的最适温度为45℃；

任选的，所述共固定化酶的操作稳定性高，在25℃下经过5次的循环使用后，过氧化氢酶和漆酶仍然保留超过61％和超过74％的活性。

3.根据权利要求1或2所述的共固定化酶，其特征在于：所述共固定化酶的贮存稳定性好，在4℃下贮存30日后，固定化过氧化氢酶和漆酶仍然保留超过65％和超过61％的活性。

4.一种权利要求1-3中任一项所述的共固定化酶的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1：配置过氧化氢酶和漆酶的混合缓冲溶液；

步骤2：将复合酶溶液与活性炭混合均匀，待吸附完全后，加入海藻酸钠，继续搅拌均匀并降温，采用注射器来制粒，将混合液滴加进CaCl₂的水溶液中，生成光滑小球，固定化胶球在CaCl₂的水溶液中被硬化，之后用水洗涤，干燥，得到共固定化酶。

5.根据权利要求4所述的共固定化酶的制备方法，其特征在于：所述步骤1包括1a将过氧化氢酶冻干粉用磷酸盐缓冲液溶解，得到过氧化氢酶溶液，1b将漆酶冻干粉用醋酸-醋酸钠缓冲液溶解，得到漆酶溶液，1c将过氧化氢酶溶液和漆酶溶液混合。

6.根据权利要求5所述的共固定化酶的制备方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液的pH＝6-7，浓度为0.05-0.1M；

任选的，所述过氧化氢酶溶液中过氧化氢酶的浓度为0.5-1.25mg/mL；

任选的，所述醋酸-醋酸钠缓冲液的pH＝4-5，浓度为0.2-0.3M；

任选的，所述漆酶溶液中漆酶的浓度为0.5-1.25mg/mL；

任选的，所述过氧化氢酶溶液和漆酶溶液混合时，过氧化氢酶和漆酶的质量比为1:2-2:1。

7.根据权利要求4所述的共固定化酶的制备方法，其特征在于：所述步骤2中，活性炭的加量与复合酶溶液w:v的比例为1:100，海藻酸钠溶液的加量与复合酶溶液的体积比例为1:5；

任选的，海藻酸钠为质量浓度1-3％的水溶液。

8.根据权利要求4所述的共固定化酶的制备方法，其特征在于：所述步骤2中，CaCl₂的水溶液质量浓度为1-3％。

9.根据权利要求4所述的共固定化酶的制备方法，其特征在于：所述步骤2中，冰水浴降温至0-4℃，固定化时间为30-60min。

10.权利要求1-3中任一项所述的共固定化酶的用途，用于苯胺废水处理。