[发明专利]一种类黑精的定量检测方法

说明书

本发明公开了一种类黑精的定量检测方法，属于检测技术领域。本发明采用模拟类黑精标品，通过标准曲线来定量检测待测样品中的类黑精含量；所述模拟类黑精标品是以葡萄糖和氨基酸为原料模拟美拉德反应，以找到与类黑精结构最相近(即红外出峰位置和峰型最为接近)的模拟产物，将其作为类黑精标品。本发明通过采用糖和20种氨基酸分别进行美拉德反应，对生成的20种反应产物和白酒糟类黑精同时进行红外(FT‑IR)结构鉴定和对比，以找到与酒糟类黑精结构最相近的模拟产物，将其作为酒糟类黑精标品，通过建立标准曲线完成白酒糟类黑精的定量，这种方法得到的标准曲线呈现良好的线性关系，且精密度和准确性均较好。

技术领域

本发明涉及一种类黑精的定量检测方法，属于检测技术领域。

背景技术

类黑精，是一类褐色的亲水性含氮聚合物，在美拉德反应的最后阶段形成。目前咖啡，可可粉，面包，黑啤酒，麦芽，蜂蜜和其他食品中已广泛发现类黑精的存在。它们除对热加工食品的香气、颜色和质地有重要影响外，近年来还发现其具有潜在的营养，生物学和功能意义，例如抗氧化性、降血压、抑菌、益生元活性等。因此，探究白酒糟类黑精将为白酒糟的高附加值利用提供新的可能性。在探究白酒糟类黑精的功能特性前，对类黑精的分离提取和其在酒糟含量的分析是十分有必要的。

由于类黑精的形成和结构十分复杂，这对类黑精的定量造成困难。研究食物中类黑精的含量对于类黑精的应用和食物中棕色物质的调控具有重要意义。目前主要有三种定量方式，一是直接将提取得到的混合物冻干，通过冻干物的重量来计算类黑精的含量，该方法无法排除杂质带来的干扰，存在较大的不准确性；二通过放射性糖标记，测定类黑精的消光系数，根据朗伯比尔定律得到类黑精含量，该方法有严谨的科学公式作支撑，准确度高，但只适用于简单的糖和氨基酸模拟产生的类黑精含量的计算；三是模拟模型类黑精标品，通过标准曲线来定量，该方法属于半定量，多应用于真正食物中。例如在烘烤麦芽中，学者将葡萄糖和甘氨酸或者天冬氨酸在一定条件下模拟美拉德反应，将反应产物作为类黑精标品定量。在白酒糟类黑精中曾报道过将葡萄糖和甘氨酸作为反应原料，模拟生成类黑精标品进而完成定量。但利用标品定量时，没有考虑糖和氨基酸反应生成的产物与样品类黑精的相似性，在标品选择的合理性问题上缺少验证。

发明内容

为了解决类黑精标品定量缺少验证的问题，本发明提供了一种验证的方法。采用糖和20种氨基酸分别进行美拉德反应，对生成的20种反应产物和白酒糟类黑精同时进行红外(FT-IR)结构鉴定和对比，以找到与酒糟类黑精结构最相近(即红外出峰位置和峰型最为接近)的模拟产物，将其作为酒糟类黑精标品，通过建立标准曲线完成白酒糟类黑精的定量。采用红外光谱对样品类黑精和模拟产物类黑精结构进行比较，是一种合理的验证类黑精标品的方法。

本发明的第一个目的是提供一种类黑精的定量检测方法，所述方法是采用模拟类黑精标品，通过标准曲线来定量检测待测样品中的类黑精含量；所述模拟类黑精标品是以葡萄糖和氨基酸为原料模拟美拉德反应，以找到与类黑精结构最相近(即红外出峰位置和峰型最为接近)的模拟产物，将其作为类黑精标品；所述模拟类黑精标品是以葡萄糖和氨基酸为原料模拟美拉德反应，将反应产物作为类黑精标品；所述氨基酸包括丝氨酸、苏氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、缬氨酸、组氨酸、亮氨酸、精氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺。

在本发明一种实施方式中，优选地，所述氨基酸包括丝氨酸、脯氨酸、精氨酸、甘氨酸。

在本发明一种实施方式中，以葡萄糖和丝氨酸为类黑精标品的标准曲线为y＝0.7722x+0.0574，y为420nm下的吸光度，x为类黑精浓度。

在本发明一种实施方式中，以葡萄糖和脯氨酸为类黑精标品的标准曲线为y＝0.6751x+0.0302，y为420nm下的吸光度x为类黑精浓度。

在本发明一种实施方式中，以葡萄糖和精氨酸为类黑精标品的标准曲线为y＝0.6106x+0.1133，y为420nm下的吸光度，x为类黑精浓度。