[发明专利]细胞周期检测方法及其所用试剂与试剂盒

权利要求书

1.细胞周期检测方法，包括：使用浓度为0.06％～0.3％(g/ml)的皂素与细胞接触增强其细胞膜的通透性，以使得DNA结合染料与核糖核酸酶能够进入细胞内并发挥活性。

2.根据权利要求1所述的细胞周期检测方法，所述皂素的浓度为0.08％～0.12％(g/ml)或0.23％～0.27％(g/ml)。

3.根据权利要求1所述的细胞周期检测方法，将所述皂素、所述DNA结合染料和所述核糖核酸酶与所述细胞共孵育。

4.根据权利要求1所述的细胞周期检测方法，所述DNA结合染料选自碘化丙啶、7-氨基放线菌素D、Hoechst 33342、Hoechst 33258、Hoechst S769121、TO-PRO-3、4',6-二脒基-2-苯基吲哚、DRAQ5^TM和DRAQ7^TM中的一种或多种；

优选的，所述DNA结合染料为70μg/ml～130μg/ml的碘化丙啶。

5.根据权利要求1所述的细胞周期检测方法，所述核糖核酸酶选自RNase I、RNaseIII、RNase B、RNase D、RNase H、RNase L、RNase P、RNase PH、RNase PhyM、RNase R、RNaseU2，RNaseN1、RNaseN2、RNase T1、RNase T2、RNase VI、RNase V、寡核糖核酸酶、核糖核酸外切酶I、核糖核酸外切酶II以及重组核糖核酸酶中的一种或多种；

优选的，所述核糖核酸酶为0.7mg/ml～1.3mg/ml的RNase I。

6.根据权利要求1～5任一项所述的细胞周期检测方法，所述皂素与细胞接触的时间为5min～15min。

7.根据权利要求1～5任一项所述的细胞周期检测方法，所述方法中不使用额外的细胞透膜剂和/或细胞固定剂。

8.用于细胞周期检测的试剂，其组成及工作浓度在以下范围内：

种类和使用量为权利要求1～7任一项中所定义的皂素、DNA结合染料与核糖核酸酶。

9.根据权利要求8所述的试剂，其特征在于，所述试剂中还包含缓冲组分。

10.试剂盒，其包含权利要求8或9所述的试剂，或包含用于配置所述试剂的各组分。