[发明专利]一种巢式PCR试剂盒在审
| 申请号： | 201910987413.6 | 申请日： | 2019-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN110592194A | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 彭志勇;祝令香;郭永;芮孝;王栋;杨文军;高娜 | 申请（专利权）人： | 北京新羿生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6848 | 分类号： | C12Q1/6848 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100190 北京市海*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 扩增 外部引物 下游引物 巢式引物 试剂盒 上游 试剂盒操作 扩增效率 巢式PCR 再使用 消化 污染 | ||
1.一种巢式PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括进行第一轮PCR扩增的一对外部引物和进行第二轮扩增的一对巢式引物，第一轮扩增的产物作为第二轮扩增的模板，然后再使用所述巢式引物进行第二轮扩增；其中第一轮的一对外部引物的上游和/或下游引物对于所述第二轮扩增的特异性有影响，所述一对外部引物的上游和/或下游引物中dT全部用dU代替，并且第二轮PCR扩增体系中包括UNG酶，其在第二轮扩增前用于消化所述一对外部引物的上游和/或下游引物。
2.根据权利要求1所述的巢式PCR试剂盒，其特征在于，所述巢式PCR试剂盒是巢式数字PCR试剂盒。
3.根据权利要求2所述的巢式PCR试剂盒，其特征在于，所述巢式PCR试剂盒是非小细胞肺癌EGFR基因20ins突变检测的巢式数字PCR试剂盒。
4.根据权利要求3所述的巢式PCR试剂盒，其特征在于，所述巢式PCR试剂盒中第一轮上游引物是SID No.6:CCACACUGACGUGCCUCUCC；和第一轮下游引物是SID No.7:AGGCAGCCGAAGGGCA。
5.根据权利要求4所述的巢式PCR试剂盒，其特征在于，所述巢式PCR试剂盒中第二轮上游引物是上游ARMS引物SID No.8:GTGGACAACCCCCACCAC；和第二轮下游引物是SID No.9:CGGTGGAGGTGAGGCAGAT。
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