[发明专利]一种基于LC-MC/MS同时测定肾上腺素及其代谢产物的方法

权利要求书

1.一种基于LC-MC/MS同时测定肾上腺素及其代谢产物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）提取：向样品中加入内标混合溶液后加入提取溶剂，所述的样品与内标混合溶液的固液比为5~15 g/mL，所述的样品与提取溶剂的固液比为1：3~5 g/mL；所述内标混合溶液包含40~200 μg/kg的肾上腺素-d₃、20~200 μg/kg的4-羟基-3-甲氧基扁桃酸-d₃、80~200 μg/kg的3,4-二羟基扁桃酸-d₃，所述提取溶剂为乙腈和水的混合液；

（2）净化：将经过提取的样品直接通过PRiME HLB固相萃取柱后，用氮气吹干，再用0.01%甲酸水溶液复溶；

（3）建立标准曲线；

（4）高效液相色谱/串联质谱测定，高效液相色谱条件如下：

色谱柱：采用SB-Aq色谱柱，规格为3.0×100 mm，1.8 μm；

流动相A为0.01%甲酸水溶液；

流动相B为乙腈；

柱温：28~32℃；

进样室温度：3~5℃；

流速：0.3~0.5 mL/min；

进样体积：1.5~2.5 μL；

采用梯度洗脱，以所述流动相的总体积为100%计：

在第0~2min，所述流动相A的体积由2%递增为20%，所述流动相B的体积由98%递减为80%；

在第2~3min，所述流动相A的体积由20%递增为80%，所述流动相B的体积由80%递减为20%；

在第3~4min，所述流动相A的体积为80%，所述流动相B为20%；

在第4~4.1min，所述流动相A的体积由80%递减为2%，所述流动相B由20%递增为98%；

在第4.1~6min，所述流动相A的体积为2%，所述流动相B为98%；

质谱条件：正离子扫描/负离子扫描；采集方式：MRM采集方式；电离电压：4.5 kV/-4.5kV；脱溶剂温度：550℃/550.0℃；

（5）利用标准曲线进行定量分析；

其中，所述的样品为畜肉、禽肉、内脏、牛奶中的一种或几种。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的提取还包括超声或振荡的步骤；所述超声进行18~22 min，所述振荡进行8~12 min。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，当所述样品为固体时，在所述超声或振荡后，还包括离心的步骤；所述离心在12000 r/min下进行8~12 min。