[发明专利]一种检测鸡rs14916609位点的基因型的引物对、试剂盒和检测方法有效
| 申请号： | 201910992269.5 | 申请日： | 2019-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN110551832B | 公开（公告）日： | 2022-04-26 |
| 发明（设计）人： | 姚俊峰;王晓亮;杨长锁;吕文纬;涂盈盈;蔡霞;严华祥;朱丽慧 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 吕纪涛 |
| 地址： | 201100 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 rs14916609 基因型 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种绿壳蛋鸡只蛋重性状密切关联的rs14916609位点的基因型的检测方法，其特征在于，由以下步骤组成：
（1）提取鸡的基因组DNA，以基因组DNA为模板用引物对进行PCR扩增，得到扩增产物；
所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；
（2）将所述步骤（1）得到的扩增产物用限制性核酸内切酶
（3）将所述步骤（2）得到的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，当电泳后显示1条亮带时，鸡rs14916609位点的基因型为GG；
当电泳后显示2条亮带时，鸡rs14916609位点的基因型为AA；
当电泳后显示3条亮带时，鸡rs14916609位点的基因型为AG；
所述基因型GG的鸡只的蛋重大于基因型AG，所述基因型AG的鸡只的蛋重大于基因型AA。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤（1）PCR扩增使用的体系每15μl包括：基因组DNA 5 ng、浓度为10 pmol/L的上下游引物分别为0.3 μl和TaqMix 7.5 μl，ddH2O补足至15 μl。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤（1）PCR扩增的程序包括：95℃ 5 min；95 ℃ 20 s，60 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，共35个循环；72 ℃ 10 min。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤（2）酶切的体系每10 μl包括：
浓度为10 pmol/L的扩增产物4 μl、10×酶切缓冲液1 μl、限制性核酸内切酶
5.根据权利要求1或4所述的检测方法，其特征在于，所述酶切的条件包括：35~42 ℃酶切50~70 min。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海市农业科学院，未经上海市农业科学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910992269.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
