[发明专利]一种检测鸡rs14916609位点的基因型的引物对、试剂盒和检测方法

说明书

本发明提供了一种检测鸡s14916609位点的基因型的引物对、试剂盒和检测方法，属于基因工程技术领域，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。rs14916609多态与鸡只的蛋重性状密切关联，可以作为鸡只的蛋重性状筛选的分子标记，可大大降低分子育种的花费，为加速改善蛋鸡蛋重的分子育种奠定了基础。采用本发明提供的试剂盒和检测方法，操作简单，准确度高，没有杂带，耗时短，仅为2～3h，费用低廉，可实现自动化检测，为鸡的育种工作提供便利，将在鸡的育种中发挥巨大作用。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种检测鸡s14916609位点的基因型的引物对、试剂盒和检测方法。

背景技术

蛋重(Egg Weight,EW)是蛋鸡饲养过程中十分重要的经济性状，直接关系到蛋鸡养殖的经济效益，长期以来都是蛋鸡育种者和养殖者十分关注的性状。蛋鸡养殖者的主要收入是鸡蛋的销售收入，而鸡蛋销售是以重量为单位的，因此蛋重直接影响这养殖者的收入，蛋重不达标，将大大降低蛋鸡养殖的经济效益。不同地区的消费者对于蛋重有着不同的偏好，有的地区喜欢蛋重较大的鸡蛋，而有的地方喜欢小蛋，因此蛋重大小对于鸡蛋在市场上的受欢迎程度也有影响，进而影响养殖场产品的销量。蛋重对蛋壳品质也有重要影响，蛋壳强度是目前养殖者最关心的蛋品质，因为蛋壳太弱的话，鸡蛋很容易破损，鸡蛋在收集、储存、运输和销售过程中的破损不仅无法销售，同时还会影响周边其他的鸡蛋，对于经济效益影响巨大，而根据前人研究结果，蛋重越大的鸡蛋，其蛋壳厚度越薄，蛋壳强度越弱，鸡蛋也越容易破损，因此如何控制蛋重大小对于养殖者的经济效益影响非常大，是蛋鸡育种和养殖过程中非常重要的一项内容。

长期以来蛋鸡养殖者对于蛋重没有一个行之有效的控制方法，而育种一直以来是通过蛋重的表型进行选择，但效果不理想，遗传进展较慢。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种检测鸡s14916609位点的基因型的引物对、试剂盒和检测方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种检测鸡s14916609位点的基因型的引物对，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

本发明还提供了一种检测鸡s14916609位点的基因型的试剂盒，包括上述技术方案所述的引物对和限制性核酸内切酶BsrG I。

本发明还提供了一种基于上述技术方案所述的引物对或上述技术方案所述的试剂盒检测鸡s14916609位点的基因型的方法，包括以下步骤：

1)提取鸡的基因组DNA，以基因组DNA为模板用上述技术方案所述的引物对进行PCR扩增，得到扩增产物；

2)将所述步骤1)得到的扩增产物用限制性核酸内切酶BsrG I进行酶切，得到酶切产物；

3)将所述步骤2)得到的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，当电泳后显示 1条亮带时，鸡s14916609位点的基因型为GG；

当电泳后显示2条亮带时，鸡s14916609位点的基因型为AA；

当电泳后显示3条亮带时，鸡s14916609位点的基因型为AG。

优选的，所述步骤1)鸡包括绿壳蛋鸡。

优选的，所述步骤1)PCR扩增使用的体系每15μl包括：基因组DNA 5ng、浓度为10pmol/L的上下游引物分别为0.3μl和Taq Mix 7.5μl，ddH₂O补足至 15μl。