[发明专利]一种生产长链二元酸的菌株及其发酵方法

说明书

本发明公开了一种热带假丝酵母菌株，及利用该菌株发酵生产长链二元酸的方法。所述菌株为热带假丝酵母(Candida tropicalis Am2525)Am2525，保藏编号为CCTCC NO:M 2019419。该长链二元酸的生产方法包括通过所述的热带假丝酵母菌株(Candida tropicalis Am2525)Am2525制备种子液，和/或；发酵生产长链二元酸。本发明所公开的热带假丝酵母菌株(Candida tropicalis Am2525)Am2525，较亲本对底物癸烷毒性的抵抗能力增强，提高了长链二元酸的产能，降低了生产成本，后续分离提纯简单，发酵生产过程易于大规模化，应用前景良好。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种菌株，特别涉及一种生产长链二元酸的菌株，及利用该菌株发酵生产长链二元酸的方法。

背景技术

长链二元酸是合成香料、尼龙工程塑料、热熔胶、树脂、耐寒性增塑剂、医药和农药等的重要原料，其结构式为HOOC(CH₂)_nCOOH，其中n为大于7的整数。其中十碳二元酸或称为十碳长链二元酸、癸二酸，化学式为HOOC(CH₂)₈COOH。其作为一种重要的单体原料，广泛用于生产聚酰胺工程塑料，如尼龙510、尼龙1010、尼龙610。也可用于耐高温润滑油、环氧树脂固化剂、合成润滑脂及人造香料、耐寒增塑剂等，是应用广泛的化工原料之一。

目前工业生产和应用的十碳二元酸是用蓖麻油为原料，通过化学法制备得到的。主要工艺流程是蓖麻油水解生成蓖麻油酸钠皂，然后进一步制备得到蓖麻油酸，蓖麻油酸在苯酚的存在下，加碱、加热进行高温裂解，生成十碳二元酸双钠盐，然后进一步加热、加酸、脱色、结晶得到十碳二元酸。采用蓖麻油催化裂解法制备十碳二元酸，生产过程复杂、在250～270℃的高温下进行反应，使用苯酚或邻甲酚有毒试剂，污染环境，严重制约着化学法生产十碳二元酸产业的发展。

生物法制备十碳二元酸具有生产工艺简单、绿色环保的特点。中国科学院微生物所的余志华 (见《微生物学报》1989年06期：0253-2654)通过诱变筛选获得一株高产菌株，在16升发酵罐上获得十碳二元酸的产量达到71g/L以上，通过水相结晶得到了十碳二元酸产品，产品纯度 99.6％以上；中科院林业土壤研究所(见《微生物学报》1979年01期)筛选得到的解脂假丝酵母发酵生产十碳二元酸的产量为30～40g/L。

在生物法制备十碳二元酸的过程中，癸烷或其类似物常作为发酵底物，这类发酵底物在发酵过程中可能存在的转化途径包括：被菌体多步氧化成为目的产物十碳二元酸、被菌体生长维持所消耗或者挥发后进入外部环境等。然而在发酵过程中，癸烷因其自身的性质会对微生物有毒害作用，抑制微生物的生长。因此，通过改良菌株，提高菌株的抗毒能力，是一个重要的研究方向。

发明内容

本发明的第一方面目的在于提供一种热带假丝酵母菌株，以解决目前热带假丝酵母菌株产十碳二元酸过程中菌体浓度低、发酵周期长、转化效率低的问题，进而解决生产成本高的技术问题。

本发明通过以下技术方案解决上述技术问题，达到本发明的第一方面目的。

本发明提供了一种热带假丝酵母菌株，该菌株为热带假丝酵母(Candidatropicalis Am2525)Am2525，保藏编号为CCTCC NO:M 2019419。

本发明所提供的菌种为热带假丝酵母(Candida tropicalis Am2525)Am2525，是以一株氧化正烷烃生产混合二羧酸的热带假丝酵母(Candida tropicalis)CAT N145(已于2011年6月9日提交位于武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC M2011192)为出发菌株，通过常压室温等离子体ARTP和紫外线照射等复合诱变、筛选培育出来的。

热带假丝酵母(Candida tropicalis Am2525)Am2525形态特征：菌落为表面光滑湿润呈乳白色有光泽、圆形、边缘整齐。