[发明专利]一种高抗氧化性脂肪乳注射液中抗氧剂含量测定方法

说明书

本发明提供一种高抗氧化性脂肪乳注射液中抗氧剂含量测定方法，所述测定方法步骤如下：样品前处理，色谱条件，测定；本发明的一种高抗氧化性脂肪乳注射液中抗氧剂含量测定方法与以往技术相比较，前处理过程采用正己烷溶解样品，并用乙醇进一步稀释降低干扰，操作简便，采用的检测方法为反相液相色谱法，检测时间成本低，效率高。

技术领域

本发明属于制药分析领域，特别涉及一种高抗氧化性脂肪乳注射液中抗氧剂含量测定方法。

背景技术

脂肪乳注射液是一种临床应用非常广泛的提供能量和必需脂肪酸的肠外营养补充剂，以植物或动物来源的油(如大豆油、中链甘油三酸酯、橄榄油、鱼油等几种油的混合物)为油相，辅以卵磷脂为乳化剂，甘油为渗透调节剂，经适当的乳化技术制备而得，脂肪乳在制备过程中，由于受到氧、光、温度等因素影响，容易发生氧化变质，注射用油在氧化的过程中会产生过氧化物，过氧化物受热会分解为小分子的复杂化合物如醛、酮、酸等，能够破坏人体细胞膜的正常生理功能，促使疾病的发生和发展，因此脂肪乳注射液中加入抗氧剂，使产品具有强抗氧化能力，出于产品质量控制需要，产品中对抗氧剂的含量进行监控。

目前采用的氧化剂多为DL-α-生育酚，DL-α-生育酚的化学名称为(±)-2，5，7，8-四甲基-2-(4′，8′，12′-三甲基十三烷基)-6-色满醇，又称维生素E醇，是主要表现出维生素E活性的一类化合物，因为其维生素活性首次在1936年针对大鼠繁殖力因素的实验中被鉴定出来，故被命名为“生育酚”，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在，它是脂溶性维生素，为一重要的抗氧化剂，DL-α-生育酚的同类物质有：d-α-生育酚；d-α-生育酚酯；DL-α-生育酚酯；琥珀酸氢d-α-生育酚酯；琥珀酸氢DL-α-生育酚酯；β-生育酚；γ-生育酚；δ-生育酚；生育酚油液；均具有维生素E的生理活性，其中以DL-α-生育酚的活性最大、抗氧化能力最强，在现有的技术里，未见专门针对脂肪乳注射液中的DL-α-生育酚含量检测的分析方法，而已有的参考方法对脂肪乳注射液处理检测的操作繁琐，也未能同时兼顾实现良好的液相峰型与良好分离的问题，为此，本发明提出一种高抗氧化性脂肪乳注射液中抗氧剂含量测定方法。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种高抗氧化性脂肪乳注射液中抗氧剂含量测定方法，本发明的高抗氧化性脂肪乳注射液中抗氧剂含量测定方法与以往技术相比较，前处理过程采用正己烷溶解样品，并用乙醇进一步稀释降低干扰，操作简便，采用的检测方法为反相液相色谱法，检测时间成本低，效率高。

为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：一种高抗氧化性脂肪乳注射液中抗氧剂含量测定方法，所述测定方法步骤如下：

步骤一：样品前处理；具体如下：

①供试品溶液的制备：称取样品，加入正己烷超声溶解稀释至刻度；取适量加入乙醇稀释至刻度，再摇匀，用0.45μm有机滤膜过滤；

②对照品溶液的制备：称取DL-α-生育酚对照品，加入乙醇溶解并稀释至刻度，配制DL-α-生育酚储备溶液；取适量加入乙醇稀释至刻度，使DL-α-生育酚的浓度约为20μg/mL；

步骤二：色谱条件；具体如下：

①色谱柱：纯硅胶色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；检测波长：280nm-290nm；流速：0.8-1.2ml/min；

②流动相：甲醇-水(70:30)；分析时间：20min，等度洗脱；柱温：20-30℃，进样量：20μl；

步骤三：测定；采用外标法，将配制的对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，按所述色谱条件分析，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保留时间定性，色谱峰面积定量，即得供试品溶液中DL-α-生育酚成分的含量。

作为本发明的一种优选实施方式，所述步骤一的①中，供试品的浓度约为5mg/mL。