[发明专利]一种提取银杏叶活性成分的方法

说明书

本发明公开了一种提取银杏叶活性成分的方法，其特征在于，该方法采用中低压制备液相色谱仪对银杏内酯粗品进行分离纯化，其中，所述分离纯化采用的色谱条件包括：采用反相硅胶作为所述中低压制备液相色谱仪的填料，以甲醇‑水溶液作为流动相。本发明的方法生产成本低，无需使用大量的有机试剂，为大量、同时快速制备高纯度白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和银杏内酯K提供了一种新方法。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种提取银杏叶活性成分的方法，尤其涉及一种同时快速制备白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和银杏内酯K的方法。

背景技术

银杏内酯(ginkgolide)化合物属于萜类化合物，由倍半萜内酯和二萜内酯组成，是银杏叶中一类重要的活性成分，主要有白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和银杏内酯K、银杏内酯L、银杏内酯M。银杏内酯类成分的化学结构很奇特，分子骨架小、结构紧密，分子中碳骨架高度官能团化，整个分子呈扭曲的笼形结构，6个五元环互相缠绕在一起，包含1个螺[4,4]壬烷碳骨架、3个γ-内酯环、1个四氢呋喃环、1个叔丁基侧链和十几个手性中心，如银杏内酯B含有11个立体中心。研究发现，银杏内酯是一类高效的血小板活化因子受体(PAF)拮抗剂。PAF是由血小板和多种炎症组织分泌产生的一种内源性磷脂，可有效诱导血小板聚集，被称为心脑血管疾病的杀手。银杏内酯可通过对PAF的特异性抑制作用，改善脑部血液循环及能量代谢，在预防和治疗心脑血管疾病方面显示了较好的市场前景。

前期文献报道多是白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和银杏内酯K其中一个或少量几个化合物的制备方法，且工序长、制备方法繁琐。因此，有必要提出一种能快速分离制备以上几个化合物的方法。

发明内容

本发明旨在提供一种同时快速制备白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和银杏内酯K的方法。具体来说，本发明提出了一种提取银杏叶活性成分的方法，其特征在于，该方法采用中低压制备液相色谱仪对银杏内酯粗品进行分离纯化，其中，色谱条件包括：所述中低压制备液相色谱仪采用反相硅胶为填料，以甲醇-水溶液为流动相。

在本发明的一些具体实施方案中，，所述银杏内酯粗品由银杏叶经乙醇提取、水分散、过滤、萃取、浓缩干燥而来。

在本发明的一些具体实施方案中，所述银杏叶内酯粗品粗品制备方法如下：

取银杏叶与乙醇加热回流提取，过滤、浓缩，得浓缩液；

向所述浓缩液加水分散，滤去不溶物，得银杏叶提取物；

乙酸乙酯作为萃取溶剂进行萃取，萃取液浓缩干燥得银杏内酯粗品。

在本发明的一些具体实施方案中，所述银杏叶提取物的制备方法如下：

取银杏叶用乙醇回流提取，过滤，获得滤液，减压浓缩至25℃时的相对密度为1.05g/ml；

再与乙醇混合至体积分数为80％，静置，过滤，收集滤液减压浓缩至无醇味；

取上述滤液与水按照体积比为1:1混合，静置，滤去不溶物。

在本发明的一些具体实施方案中，所述银杏叶与乙醇的质量体积比为1:10～30。

在本发明的一些具体实施方案中，所述乙醇为乙醇的水溶液，浓度为60％～95％(体积分数)。

在本发明的一些具体实施方案中，所述反相硅胶包括但不限于：以YMC-C18、Acuity-C18或XB-C18为分离填料。

在本发明的一些具体实施方案中，所述甲醇-水溶液的比例为30-50:70-50(V/V)；优选为35-45:65-55。