[发明专利]携带突变的肿瘤驱动基因的干细胞及其用途

权利要求书

1.构建的细胞，其是个体(优选为人)的干细胞，且包含可受控表达的突变的肿瘤驱动基因，所述突变的肿瘤驱动基因选自突变的KRas、突变的p53和突变的BRAC1/2中之一、之二或三者，其中“突变的”是指能驱动细胞发生癌变的任何的相对于个体的野生型KRas、p53或BRAC1/2的突变，例如所述突变可为P53上172和175位氨基酸残基的突变；K-Ras上12位氨基酸上的突变，如KRas^G12D和p53^R172H突变。

2.根据权利要求1所述的构建的细胞，其中所述肿瘤驱动基因是纯合的或杂合的，例如通过用突变的KRas、p53或BRAC1/2的肿瘤驱动基因替换个体中的野生型基因，优选地，以同源重组的方式导入所述突变的肿瘤驱动基因。

3.根据权利要求1所述的构建的细胞，其中所述干细胞选自由以下组成的组：成体干细胞、胚胎干细胞、胎儿干细胞、间充质干细胞、神经干细胞、全能干细胞、多能干细胞(包括诱导的多能干细胞，iPSCs)、寡能干细胞、单能干细胞(例如可以定向分化为肺细胞、胃细胞、肾细胞等的单能干细胞)、内皮干细胞、骨髓干细胞、脐带血干细胞、成体外周血干细胞、成肌细胞干细胞、皮肤成纤维细胞干细胞，及其组合，优选地，所述干细胞是iPSCs，例如成体细胞诱导的多能干细胞。

4.根据权利要求1、2或3所述的构建的细胞，其中所述包含突变的肿瘤驱动基因的干细胞被诱导分化为特异性组织细胞或其祖细胞(例如胰腺组织细胞、肺细胞、肝细胞、胃细胞、头颈部细胞、淋巴细胞、食道组织细胞、肠细胞(如结肠细胞、直肠细胞等)、肾细胞、膀胱细胞、胶质母细胞、乳腺细胞、前列腺细胞、卵巢细胞、神经母细胞、中枢神经细胞)，且任选地，通过激活或开启突变的肿瘤驱动基因的转录或表达使得所述特异性组织细胞癌变。

5.根据权利要求4所述的构建的细胞，所述癌变的细胞进一步被溶瘤病毒感染，示例性地，所述癌变的细胞进一步被腺病毒感染或痘苗病毒感染，优选地，所述构建的细胞还可进一步包含表达癌特异性抗原的核酸。

6.预防癌症的疫苗组合物，其包含根据权利要求1-5中任一项所述构建的细胞，优选地其包含权利要求5中所定义的被腺病毒感染的细胞和/或被痘苗病毒感染的细胞。

7.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其中所述构建的细胞是灭活的。

8.根据权利要求6或7所述的疫苗组合物，其中所述癌症为实体瘤或血癌，优选地，所述实体瘤选自胰腺癌、肺癌、肝癌、胃癌、头颈癌、淋巴癌、食道癌、肠癌(如结肠癌、直肠癌等)、肾癌、膀胱癌、胶质母细胞瘤、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、神经母细胞瘤、中枢神经系统肿瘤或黑色素瘤。

9.制备用于预防癌症的疫苗的方法，其包括将权利要求1-5中任一项所述构建的细胞包含在疫苗中的步骤。

10.权利要求1-5中任一项所述构建的细胞在制备用于预防癌症的疫苗组合物中的用途。