[发明专利]一种方格星虫非变性胶原蛋白的制备方法

说明书

本发明公开了一种方格星虫非变性胶原蛋白的制备方法，以方格星虫为原料，建立了以低温匀浆技术处理后采用超声辅助酶法提取非变性胶原蛋白提取工艺，采用亲水超滤技术快速分离纯化方格星虫胶原蛋白，得到高纯度的胶原蛋白产品。本发明具有制备工艺简单，胶原蛋白提取率高，纯度高、资源利用率高，提取经济效益高等特点，有效提高方格星虫产品附加值，实现方格星虫高值化利用为胶原蛋白的制备提供新来源。

技术领域

本发明属于胶原蛋白提取技术领域，具体涉及一种方格星虫非变性胶原蛋白的制备方法。

背景技术

方格星虫(Sipunculs nudus)属星虫门星虫科，又称光裸星虫、沙肠子等，俗称“沙虫”，主要分布在大西洋、印度洋、太平洋沿岸以及我国的广东、广西、海南和台湾沿海地区，一般生活在沿海滩涂的沙质区。方格星虫不仅味道鲜美，广受海峡两岸大众喜爱，而且是我国珍贵“海药”之一。方格星虫性寒、味甘、咸，具有滋阴降火、清肺补虚及补肾养颜等功能，可治疗骨蒸潮热、阴虚盗汗、肺虚喘咳、胸闷痰多以及妇女产后乳汁稀少等症，对治疗肝炎、肺痨咳嗽、神经衰弱与小儿脾虚等症均有效果。因此方格星虫在闽南素有“动物人参”的美称。方格星虫含有丰富的蛋白质(83.6％-86.5％)，多糖，多种氨基酸和微量元素，具有抗氧化、调节免疫、抗菌、抗辐射、抗病毒、抗疲劳、延缓衰老等功效。

胶原蛋白是-种白色、不透明、无支链纤维性蛋白质类高分子物质，是细胞外基质的主要成分，是动物体内含量最多、分布最广的一类蛋白质。广泛分布于结缔组织、皮肤、骨骼等，起着支撑器官、保护机体的功能，是决定结缔组织韧性的主要因素。其结构特征是由3条左手螺旋构型的α链构成三螺旋结构，然后又相互缠绕成右手超螺旋结构。胶原蛋白具有润滑关节、强韧骨骼、保护血管、促进新陈代谢、增强免疫力、止血性能、支架作用等，已经广泛应用于食品工业、生物制药工业、美容化妆品工业等多个领域。

目前以水产类为原料制备胶原蛋白的研究多集中在水产副产品上，大部分水产胶原蛋白的亚氨酸(脯氨酸和羟脯氨酸)含量较低，所以其热稳定性较差，如：真鳕鱼皮胶原蛋白的热变性温度仅为15℃，草鱼鱼皮胶原蛋白的热变性温度(34℃)。而传统的胶原蛋白的提取方式是一个高耗能、高耗溶剂、高耗时的过程，对环境的破坏大，而且提取过程难以控制，得到的多为变性胶原蛋白产品。CN101381411A公开了用除去非胶原蛋白的星虫体壁为原料，通过酸性蛋白酶或摩尔浓度为0.2-2.0mol/L的酸提取，经离心、盐析、再离心、透析、冻干步骤得到星虫胶原蛋白，该方法中利用氯化钠盐析和透析袋透析获得目的胶原蛋白这种方法只能在实验室进行小规模的纯化，成本较高，无法进行放大生产。CN106636275A公开了将虫浆经过超声波和电磁场后，将虫浆的细胞破碎利于方格星虫中蛋白质的酶解，再通过高压酶解提取，胃蛋白酶和木瓜蛋白酶复配使用，显著提高方格星虫中蛋白质的提取率，该方法中100-120℃灭酶，破坏了胶原蛋白的三螺旋结构，胶原蛋白的变性，导致胶原蛋白的失活。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种方格星虫非变性胶原蛋白的制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种方格星虫非变性胶原蛋白的制备方法，包括如下步骤：

(1)将方格星虫去除内脏，清洗后剪成0.8-1.2mm×0.8-1.2mm的碎块，然后于0-4℃下采用异丙醇溶液除脂肪和氯化钠溶液处理除去方格星虫中的可溶性非胶原蛋白，获得预处理后的方格星虫；

(2)将上述预处理后的方格星虫与pH＝5-10的磷酸盐缓冲液混合后，以12000-18000rpm的转速于0-5℃分散10-30min；