[发明专利]一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法

权利要求书

1.一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：经过动物双歧杆菌菌悬液的制备、水相的配制、油相的配制、油包水型乳液的制备、固化、离心洗涤和冷冻干燥步骤，完成口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法；具体步骤如下：

(1)动物双歧杆菌菌悬液的制备：

a.菌种的活化及发酵

将保存在冰箱中的菌种接种到固体培养基上，在37℃培养箱中厌氧培养22-24h，选取单菌落接种到液体培养基中，37℃培养箱中厌氧培养22-24h，活化好的菌种以1％-2％的接种量接种到液体培养基中，37℃环境下培养15-24h；

b.将培养好的菌液在高速旋转条件下进行离心处理，弃上清液，无菌生理盐水重悬，完成菌悬液的制备；

(2)水相的配制：制备质量浓度为1％-2％海藻酸钠溶液，磁力搅拌器搅拌，充分溶解后灭菌，加入菌悬液，混合均匀；

(3)油相的配制：制备含1％-5％span-80的植物油，搅拌均匀；

(4)油包水型乳液的制备：将水相加入至油相，搅拌器搅拌至均匀稳定的乳白色油包水乳液，反应温度为25-37℃；

(5)固化：加入质量浓度为3％-8％CaCl₂溶液，进行搅拌固化；

(6)离心洗涤：在5000r/min转速下离心5-10min，收集沉淀，用无菌生理盐水洗涤2-3次，得到微胶囊沉淀；

(7)冷冻干燥：将收集的微胶囊沉淀以1：3的比例加入到冻干保护剂中，搅拌均匀，置于冻干机中冻干，冷冻干燥结束后收集微胶囊动物双歧杆菌菌粉，在2-8℃环境下保存，即完成了口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备。

2.根据权利要求1所述的一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的高速旋转的转速为5000r/min，离心时间为5-10min。

3.根据权利要求1所述的一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中的转速为150-300r/min，搅拌时间为30min-1h。

4.根据权利要求1所述的一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中的CaCl₂溶液添加量占总量的20％-50％。

5.根据权利要求1所述的一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中的搅拌转速为150-300r/min，搅拌固化时间为2-3h，反应温度为25-37℃。

6.根据权利要求1所述的一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：所述步骤(7)中的冻干保护剂包括1％-10％蔗糖、2％-10％脱脂奶粉，余量为水。