[发明专利]与小麦株高相关的KASP引物组及其应用有效

专利信息
申请号: 201911006441.1 申请日: 2019-10-22
公开(公告)号: CN110656198B 公开(公告)日: 2021-01-08
发明(设计)人: 姜朋;马鸿翔;何漪;张旭;吴磊 申请(专利权)人: 江苏省农业科学院
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 江苏圣典律师事务所 32237 代理人: 杨文晰
地址: 210014 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 小麦 相关 kasp 引物 及其 应用
【权利要求书】:

1.与小麦株高相关的KASP引物组,其特征在于,所述引物组包括以下两组KASP引物:

1)核苷酸序列分别如SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.3所示的特异性引物组;

2)核苷酸序列分别如SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.6所示的特异性引物组。

2.如权利要求1所述与小麦株高相关的KASP引物组在检测小麦株高中的应用,具体步骤如下:

1)提取样品小麦DNA;

2)利用IACX9152引物组对样品小麦进行PCR扩增,PCR扩增同时加入宁麦9号与扬麦158的DNA作为对照,若样品小麦的PCR扩增产物的荧光信号数据经KASP荧光分析仪分析显示与扬麦158荧光信号数据聚集在一起,则说明样品小麦具有IACX9152引物组的非优势等位变异基因型C,如与宁麦9号荧光信号数据聚集在一起,则说明样品小麦具有IACX9152引物组的优势等位变异基因型T;

所述IACX9152引物组包括IACX9152_F1 、IACX9152_F2 以及KASP通用引物IACX9152_R;引物IACX9152_F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示;引物IACX9152_F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示的;引物IACX9152_R的核苷酸序列与SEQ ID NO.3一致;

3)利用BobWhite_c1796_701引物组对样品小麦进行PCR扩增,PCR扩增同时加入宁麦9号与扬麦158的DNA作为对照,若样品小麦的PCR扩增产物的荧光信号数据经KASP荧光分析仪分析显示与宁麦9号荧光信号数据聚集在一起,则说明样品小麦具有BobWhite_c1796_701引物组的非优势等位变异基因型G,如与扬麦158荧光信号数据聚集在一起,则说明样品小麦具有BobWhite_c1796_701引物组的优势等位变异基因型T;

所述BobWhite_c1796_701引物组包括BobWhite_c1796_701_F1 、BobWhite_c1796_701_F2 以及KASP通用引物BobWhite_c1796_701_R;引物BobWhite_c1796_701_F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示;引物BobWhite_c1796_701_F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示;引物BobWhite_c1796_701_R的核苷酸序列与SEQ ID NO.6一致;

4)若步骤2)和步骤3)的PCR检测的样品小麦的对应基因型均为T,则认为该样品小麦株高显著低于对应基因型为C或G的小麦;

所述小麦样品为宁麦9号与扬麦158的杂交后代。

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