[发明专利]与小麦株高相关的KASP引物组及其应用有效
申请号: | 201911006441.1 | 申请日: | 2019-10-22 |
公开(公告)号: | CN110656198B | 公开(公告)日: | 2021-01-08 |
发明(设计)人: | 姜朋;马鸿翔;何漪;张旭;吴磊 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 杨文晰 |
地址: | 210014 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦 相关 kasp 引物 及其 应用 | ||
1.与小麦株高相关的KASP引物组,其特征在于,所述引物组包括以下两组KASP引物:
1)核苷酸序列分别如SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.3所示的特异性引物组;
2)核苷酸序列分别如SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.6所示的特异性引物组。
2.如权利要求1所述与小麦株高相关的KASP引物组在检测小麦株高中的应用,具体步骤如下:
1)提取样品小麦DNA;
2)利用IACX9152引物组对样品小麦进行PCR扩增,PCR扩增同时加入宁麦9号与扬麦158的DNA作为对照,若样品小麦的PCR扩增产物的荧光信号数据经KASP荧光分析仪分析显示与扬麦158荧光信号数据聚集在一起,则说明样品小麦具有IACX9152引物组的非优势等位变异基因型C,如与宁麦9号荧光信号数据聚集在一起,则说明样品小麦具有IACX9152引物组的优势等位变异基因型T;
所述IACX9152引物组包括IACX9152_F1 、IACX9152_F2 以及KASP通用引物IACX9152_R;引物IACX9152_F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示;引物IACX9152_F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示的;引物IACX9152_R的核苷酸序列与SEQ ID NO.3一致;
3)利用BobWhite_c1796_701引物组对样品小麦进行PCR扩增,PCR扩增同时加入宁麦9号与扬麦158的DNA作为对照,若样品小麦的PCR扩增产物的荧光信号数据经KASP荧光分析仪分析显示与宁麦9号荧光信号数据聚集在一起,则说明样品小麦具有BobWhite_c1796_701引物组的非优势等位变异基因型G,如与扬麦158荧光信号数据聚集在一起,则说明样品小麦具有BobWhite_c1796_701引物组的优势等位变异基因型T;
所述BobWhite_c1796_701引物组包括BobWhite_c1796_701_F1 、BobWhite_c1796_701_F2 以及KASP通用引物BobWhite_c1796_701_R;引物BobWhite_c1796_701_F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示;引物BobWhite_c1796_701_F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示;引物BobWhite_c1796_701_R的核苷酸序列与SEQ ID NO.6一致;
4)若步骤2)和步骤3)的PCR检测的样品小麦的对应基因型均为T,则认为该样品小麦株高显著低于对应基因型为C或G的小麦;
所述小麦样品为宁麦9号与扬麦158的杂交后代。
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