[发明专利]一种包埋蛋清源活性肽的纳米脂质体的制备方法

权利要求书

1.一种包埋蛋清源活性肽的纳米脂质体的制备方法,其特征在于：

步骤一、脂质体制备：

取一定量的蛋黄卵磷脂、胆固醇溶解于温度为50～70℃的热乙醇中，使得卵磷脂浓度为0.5mg/ml～20mg/ml，胆固醇浓度为0.1mg/ml～2mg/ml，使用高速均质机以19，000rpm转速均化5min，进行初步均质，后使用高压均质机进行高压均质，均质压力10～60mpa，均质时间1～11min；得到粒径<150nm,电势小于-25mV，稳定性好的空白脂质体；

步骤二、蛋清源活性肽制备：

取一定量蛋清蛋白粉,按料液质量比为1：5～1：20配制成蛋清蛋白粉原料液,加热至80℃～100℃,持续5～10min,进行变性处理,然后冷却至50℃～60℃,调节PH值至7-11,加入碱性蛋白酶,持续水解2h～3h后,进行沸水浴灭酶,最后离心9000r/min 10min处理,将上清液依次经过分子量为30KDa、10KDa、3KDa、1KDa的超滤膜，再利用分子量200Da钠滤膜进行除盐处理，得到分子量为200Da～1KDa蛋清源活性肽；将滤液浓缩后喷雾干燥得到蛋清源活性肽；

步骤三、包埋蛋清源活性肽的脂质体制备：

溶解由步骤一制得的蛋清源活性肽，浓度与卵磷脂浓度相同为0.5mg/ml～20mg/ml，取脂质体与肽的体积比1：5～5：1,搅拌状态下将脂质体滴加进入肽溶液中，得到包埋蛋清肽的纳米脂质体,搅拌后进行超声处理超声功率0～200w，超声时间0～250s，测量其粒径和电势分布情况,得到粒径<300nm,电势小于35mv,稳定性良好的包埋蛋清肽的纳米脂质体溶液。

2.按照权利要求1所述的一种包埋蛋清源活性肽的纳米脂质体的制备方法,其特征在于：蛋黄卵磷脂、胆固醇溶解于温度为50～70℃的热乙醇中，使得卵磷脂浓度为0.5mg/ml～20mg/ml，乙醇代替了传统制作脂质体的氯仿，安全无毒对人体无危害。

3.按照权利要求1所述的一种包埋蛋清源活性肽的纳米脂质体的制备方法,其特征在于：包埋的芯材为分子量为200Da～1KDa蛋清源活性肽，经检测抗氧化能力为未分离组分的蛋清源活性肽的3倍，有着良好的抗氧化能力，有着良好的功能性。

4.按照权利要求1所述的一种包埋蛋清源活性肽的纳米脂质体的制备方法,其特征在于：产品粒径较小，空白的脂质体粒径粒径<150nm，包埋蛋清肽后的脂质体粒径<300nm，储藏稳定性良好，在常温条件和冷藏条件下贮藏一月粒径电位均无明显变化，可长期储存。

5.按照权利要求1所述的一种包埋蛋清源活性肽的纳米脂质体的制备方法,其特征在于：运用了高压均质和乙醇注入联用的的制作方法,摆脱了实验室方法薄膜分散法制备脂质体受限于旋转蒸发仪的尺寸而不能放大生产的弊端，操作简单,参数条件温和,可规模化生产，每次生产量可达到5升以上，生产周期短，易于在工业化生产中应用。