[发明专利]一种水产品中泰妙菌素和沃尼妙林的检测方法

权利要求书

1.一种水产品中泰妙菌素和沃尼妙林的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）样品预处理：将水产品组织样品置于薄膜袋中密封后进行微冻，将微冻的样品进行间歇研磨匀质，得到匀质样品；

（2）提取：在匀质样品中加入乙腈进行超声提取后，离心取上清液；离心固体物用乙腈重复以上操作提取一次，合并两次提取的上清液，加入乙腈定容，得提取液；

（3）净化：取适量提取液置于预先加有N-丙基乙二胺（PSA）的离心管中，涡旋后离心，取上清液；

（4）浓缩转溶：取适量上清液氮气吹干，用流动相A与流动相B的混合液溶解，微孔过滤后，UPLC-MS/MS上机检测分析。

2.根据权利要求1所述的一种水产品中泰妙菌素和沃尼妙林的检测方法，其特征在于，步骤（1）中，间歇研磨为研磨2~3s，停止1s。

3.根据权利要求1所述的一种水产品中泰妙菌素和沃尼妙林的检测方法，其特征在于，步骤（2）中，步骤（2）中，取1g匀质样品并加入10~12mL乙腈，超声提取10~15min；5000~6000r/min离心5~8min；加入乙腈定容至25mL。

4.根据权利要求1所述的一种水产品中泰妙菌素和沃尼妙林的检测方法，其特征在于，步骤（3）中，取10 mL提取液加入预先加有30~50mgN-丙基乙二胺的离心管中；涡旋2~5min；5000~6000r/min离心5~8min。

5.根据权利要求1所述的一种水产品中泰妙菌素和沃尼妙林的检测方法，其特征在于，步骤（4）中，取5mL上清液于40℃氮气吹干；流动相A为0.05%甲酸-5mM乙酸铵-水溶液，流动相B为乙腈，混合液中，流动相A：流动相B（V:V）=8.5：1.5；经0.22μm微孔滤膜过滤。

6. 根据权利要求1或5所述的一种水产品中泰妙菌素和沃尼妙林的检测方法，其特征在于，步骤（4）中，色谱条件：Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；柱温30℃；进样量5μL；流动相：A=0.05%甲酸-5mM乙酸铵-水溶液，B=乙腈；流速0.25mL/min；梯度洗脱：0～0.5 min，15% B；0.5～1.5 min，15%～65% B；1.5～4.0 min，65% B；4.0～4.5 min，65%～15% B；4.5～5.0 min，15% B。

7. 根据权利要求6所述的一种水产品中泰妙菌素和沃尼妙林的检测方法，其特征在于，步骤（4）中，质谱条件：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：多反应监测（MRM），正离子模式；毛细管电压：3.0KV；离子源温度120℃；脱溶剂气温度：350℃；干燥气体流速800L/h；碰撞池压力：3.0×10^－3 mbar。