[发明专利]基于浮萍研究细菌功能的方法在审
申请号: | 201911016291.2 | 申请日: | 2019-10-24 |
公开(公告)号: | CN110699419A | 公开(公告)日: | 2020-01-17 |
发明(设计)人: | 黄卫娟;安玉兴;孙东磊;卢颖林;赵欢欢 | 申请(专利权)人: | 广东省生物工程研究所(广州甘蔗糖业研究所) |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;A01G31/00 |
代理公司: | 44224 广州华进联合专利商标代理有限公司 | 代理人: | 林青中 |
地址: | 510300 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 浮萍 细菌功能 水生环境 培养基 无菌 培养液 扩大培养 灭菌处理 生理指标 检测 灭菌 蔗糖 研究 抗生素 微生物 清洗 细菌 核实 帮助 | ||
1.一种基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)提供无菌浮萍:将浮萍经过清洗及灭菌处理,将浮萍转移至含有抗生素和蔗糖的1/2SH培养基中培养4~10天后,带核实确认浮萍充分灭菌后再于2×SH培养液中扩大培养;
2)将待检测的细菌与所述无菌浮萍于1/2SH培养基共培养;
3)检测感兴趣的浮萍-微生物互作生理指标。
2.根据权利要求1所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,所述清洗包括无菌水和/或盐溶液清洗;
所述盐溶液包括以下组分:
127mM~147mM NaCl,1.7mM~3.7mM KCl,5mM~15mM Na2HPO4,1.3mM~2.3mM KH2PO4,0.3mM~0.7mM MgSO4,0.7mM~1.3mM CaCl2,0.07%~0.13%(v/v)Triton-X100,且所述盐溶液pH=7.0~7.8。
3.根据权利要求1所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,所述灭菌处理的条件包括使用3%~7%(g/100ml)次氯酸钠洗涤1.5min~2.5min。
4.根据权利要求1所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,所述核实确认浮萍充分灭菌的方法为:
将浮萍置于细菌培养基上,24℃~32℃培养12h~24h后,若浮萍周围无菌落产生,则代表浮萍充分灭菌。
5.根据权利要求1所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,所述抗生素为头孢噻亏。
6.根据权利要求1或5所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,所述抗生素的浓度为0.08%~0.12%(g/100ml),所述蔗糖的浓度为0.3%~0.7%(g/100ml)。
7.根据权利要求1所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,步骤2)中,所述待检测的细菌在共培养时的菌液OD600=(0.1~0.3)。
8.根据权利要求1所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,在步骤2)中,同时设置空白对照和/或阳性对照;
所述空白对照未加入菌液;
所述阳性对照加入有已知功能的菌液。
9.根据权利要求1所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,所述待检测的细菌为分离自水生植物的细菌。
10.根据权利要求1所述的基于浮萍研究细菌功能的方法,其特征在于,所述互作生理指标选自浮萍的下列指标中的一种或多种:
生长速率、生物量、叶绿素含量、水体氮磷的吸收速率、降解重金属速率、淀粉含量以及蛋白质含量。
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