[发明专利]基于浮萍研究细菌功能的方法

说明书

本发明涉及水生环境细菌功能研究领域，具体而言，涉及一种基于浮萍研究细菌功能的方法。该方法包括：1)提供无菌浮萍：将浮萍经过清洗及灭菌处理，将浮萍转移至含有抗生素和蔗糖的1/2SH培养基中培养4～10天后，带核实确认浮萍充分灭菌后再于2×SH培养液中扩大培养；2)将待检测的细菌与所述无菌浮萍于1/2SH培养基共培养；3)检测感兴趣的浮萍‑微生物互作生理指标。本发明能够帮助开展水生环境细菌功能的研究。

技术领域

本发明涉及水生环境细菌功能研究领域，具体而言，涉及一种基于浮萍研究细菌功能的方法。

背景技术

浮萍是一种小型的浮水植物，喜生于富含微量元素以及有机质的静水水域，如稻田、湖泊、池沼等。浮萍的广布范围较广，从温带到热带区域均有分布，极少数也能在极端气候条件下生存。浮萍的繁殖速率几乎接近指数增长，在最佳生长条件下其生物量约2～4天可翻一倍。浮萍自身具有体积小、生长速率快、氮磷吸收能力强等较多的优点。浮萍基因组已完成测序，与模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组(130Mb)大小相似。因浮萍基因组较小、结构简单、重复序列少、营养繁殖、遗传周期短(营养条件良好的情况下约30h繁殖一代)、易于采集与培养等优点，是植物模式系统的理想材料，便于植物生长发育、生理病理、基因组学与分子遗传进化等研究工作。

近年来，浮萍与微生物的互作研究发现，浮萍微生物能够促进浮萍生长速率、增加生物量、提高叶绿素含量、加快富营养化水体氮磷的吸收、降解重金属、促进淀粉和蛋白质含量等。但多数研究对浮萍接种细菌时，接种的浮萍因自身含有微生物，接种菌可能与宿主微生物相互作用，或竞争或互利，因而获得的促生结果不能完全总结为接种菌的作用效果。目前，多数研究植物与微生物互作是以模式植物拟南芥来开展，将拟南芥种子灭菌，获得无菌拟南芥来研究单一菌株或构建的菌群对其作用影响。尚缺乏以“水生模式植物”浮萍，来开展水生环境细菌功能的研究。

发明内容

本专利旨在提供一种基于无菌浮萍植物体系，通过分离自水生植物的细菌及构建的菌群，研究其促生长功能的方法。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明涉及一种基于浮萍研究细菌功能的方法，包括如下步骤：

1)提供无菌浮萍：将浮萍经过清洗及灭菌处理，将浮萍转移至含有抗生素和蔗糖的1/2SH培养基中培养4～10天后，带核实确认浮萍充分灭菌后再于2×SH培养液中扩大培养；

2)将待检测的细菌与所述无菌浮萍于1/2SH培养基共培养；

3)检测感兴趣的浮萍-微生物互作生理指标。

本发明建立一种基于“水生模式植物”浮萍的细节功能研究体系，能够帮助研究细菌的防病促生机理，对宿主植物是否致病以及微生物与植物建立的共生关系、它们之间的相互作用如何等问题，能够帮助开展水生环境细菌功能的研究，使农业生产系统向具更高水平的生物多样性和更稳定的自我调节机制方向发展。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明一个实施例中细菌对浮萍的生长促进影响结果图；Sterile：无菌浮萍；1A：阳性对照；A3a、R8a和L4c：从浮萍分离的细菌菌株；Com：三种细菌构成的菌群；p-value≤0.01＝**,p-value≤0.001＝***,p-value≤0.0001＝****。

具体实施方式