[发明专利]一种提高回收率的鸡粪抗生素提取和净化方法

权利要求书

1.一种提高回收率的鸡粪抗生素提取和净化方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：对鸡粪样品进行冷冻干燥、粉碎和过筛；

步骤2：配制待检抗生素的混标使用液，向经过步骤1处理的鸡粪样品中加入混标使用液；

步骤3：将缓冲溶液和提取组分混合配制成提取液，所述提取液根据pH条件和/或组分条件的变化制备数组；将经过步骤2处理的鸡粪样品用所述数组提取液分别单独使用或数次交错使用，进行提取和分离操作，得到数组提取物溶液；

步骤4：将步骤3得到的提取物溶液用HLB固相萃取小柱净化浓缩，洗脱后得到提取物洗脱液，所述提取物洗脱液干燥浓缩定容后得到检测样品液；

步骤5：检测步骤4得到的检测样品液中各种抗生素的含量，计算由于步骤3操作的不同而得到的数组检测样品液的样品加标回收率，根据样品加标回收率确定提取液适宜的pH条件、组分条件和组合使用条件；

步骤6：选用步骤5确定的适宜的pH和组分条件的提取液，对经过步骤2处理的鸡粪样品进行提取和分离操作，得到提取物溶液；

步骤7：调节步骤6得到的提取物溶液的pH，根据pH不同分为多组；

步骤8：将步骤7得到的数组提取物溶液分别用HLB固相萃取小柱净化浓缩，洗脱后得到数组提取物洗脱液，所述数组提取物洗脱液干燥浓缩定容后得到数组检测样品液；

步骤9：检测步骤8得到的检测样品液中各种抗生素的含量，计算由于步骤7调节pH而得到的数组检测样品液的样品加标回收率，根据样品加标回收率确定提取物溶液适宜的pH条件；

步骤10：利用前述步骤所确定的适宜的pH条件、组分条件和组合使用条件的提取液对步骤1得到的鸡粪样品进行提取和分离操作，得到提取物溶液；调节提取物溶液至步骤9所确定的适宜的pH条件；将所述提取物溶液用HLB固相萃取小柱净化浓缩，洗脱后得到提取物洗脱液，所述提取物洗脱液干燥浓缩定容后得到用于给出最终检测结果的检测样品液。

2.按照权利要求1所述的一种提高回收率的鸡粪抗生素提取和净化方法，其特征在于：在步骤3-步骤5中对混标使用液进行相同的操作，得到混标使用液的空白加标回收率，利用空白加标回收率与样品加标回收率对比，辅助确定提取液适宜的pH条件、组分条件和组合使用条件；在步骤6-步骤9中对混标使用液进行相同的操作，得到混标使用液的空白加标回收率，利用空白加标回收率与样品加标回收率对比，辅助确定提取物溶液适宜的pH条件。

3.按照权利要求1所述的一种提高回收率的鸡粪抗生素提取和净化方法，其特征在于，在步骤9完成后还进行如下额外步骤：

额外步骤9-1：将缓冲溶液和提取组分混合配制成提取液，所述提取液根据pH条件和/或组分条件的变化制备数组；将经过步骤2处理的鸡粪样品用所述数组提取液分别单独使用或数次交错使用，进行提取和分离操作，得到数组提取物溶液；

额外步骤9-2：调节额外步骤9-1得到的数组提取物溶液的pH全部调至步骤9所确定的适宜的pH条件；

额外步骤9-3：将额外步骤9-2得到的提取物溶液用HLB固相萃取小柱净化浓缩，洗脱后得到提取物洗脱液，所述提取物洗脱液干燥浓缩定容后得到检测样品液；

额外步骤9-4：检测额外步骤9-3得到的检测样品液中各种抗生素的含量，计算由于额外步骤9-1操作的不同而得到的数组检测样品液的样品加标回收率，根据样品加标回收率确定提取液适宜的pH条件、组分条件和组合使用条件；

额外步骤9-4完成后进行步骤10的操作，在步骤10中，利用额外步骤9-4所确定的适宜的pH条件、组分条件和组合使用条件的提取液对步骤1得到的鸡粪样品进行提取和分离操作。