[发明专利]以纳米金为显色探针的磷酸吡哆醛快速测定方法

权利要求书

1.一种纳米金为显色探针的磷酸吡哆醛快速测定方法，其特征是利用磷酸吡哆醛与纳米金作用，导致纳米金聚集而表现出溶液颜色和紫外-可见吸收光谱特征的变化，来测定磷酸吡哆醛浓度；利用纳米金溶液颜色的变化以判断磷酸吡哆醛的浓度；所使用纳米金由以下步骤制备得到：首先，取400 μL浓度为213 mmol/L的巯基乙胺盐酸盐和2.23 mL浓度为10mg/mL的HAuCl₄加入到含37.5 mL水的烧杯中，室温搅拌反应20 min；结束后，向上述反应液中加入10 μL浓度为10 mmol/L的NaBH₄，而后继续室温搅拌反应30 min，即得巯基乙胺-纳米金粗品；将所制得的巯基乙胺-纳米金粗品用截留分子量为7000的透析袋进行纯化处理，得到巯基乙胺-纳米金纯品；将所得巯基乙胺-纳米金纯品密封避光，置于4 ℃冰箱保存、备用。

2.一种纳米金为显色探针的磷酸吡哆醛快速测定方法，其特征是利用磷酸吡哆醛与纳米金作用，导致纳米金聚集而表现出溶液颜色和紫外-可见吸收光谱特征的变化，来测定磷酸吡哆醛浓度；利用纳米金在700 nm与525 nm波长处的吸光度比值A₇₀₀/A₅₂₅变化以测定磷酸吡哆醛的浓度；所使用纳米金由以下步骤制备得到：首先，取400 μL浓度为213 mmol/L的巯基乙胺盐酸盐和2.23 mL浓度为10 mg/mL的HAuCl₄加入到含37.5 mL水的烧杯中，室温搅拌反应20 min；结束后，向上述反应液中加入10 μL浓度为10 mmol/L的NaBH₄，而后继续室温搅拌反应30 min，即得巯基乙胺-纳米金粗品；将所制得的巯基乙胺-纳米金粗品用截留分子量为7000的透析袋进行纯化处理，得到巯基乙胺-纳米金纯品；将所得巯基乙胺-纳米金纯品密封避光，置于4 ℃冰箱保存、备用。

3.根据权利要求1或2所述的纳米金为显色探针的磷酸吡哆醛快速测定方法，其特征是将不同浓度的磷酸吡哆醛和巯基乙胺-纳米金依次加入到醋酸盐缓冲溶液中，混合均匀，室温反应0.25~10分钟，结束后目视观察颜色特征或测定吸光度比值A₇₀₀/A₅₂₅；当目视观察颜色特征时，随着磷酸吡哆醛浓度在0~0.5 μmol/L的区间中逐渐增大，巯基乙胺-纳米金的颜色由酒红色→粉红色→紫色→蓝色进行变化；当测定吸光度比值A₇₀₀/A₅₂₅时，磷酸吡哆醛浓度在0.25~0.5 μmol/L范围内变化时，巯基乙胺-纳米金的吸光度比值A₇₀₀/A₅₂₅随着磷酸吡哆醛浓度的增加而增大。

4.根据权利要求3所述的纳米金为显色探针的磷酸吡哆醛快速测定方法，其特征是所使用的磷酸吡哆醛、巯基乙胺-纳米金和醋酸盐缓冲溶液体积比为1:1:3，反应总体积为1mL。

5.根据权利要求3所述的纳米金为显色探针的磷酸吡哆醛快速测定方法，其特征是所使用的醋酸盐缓冲溶液的pH和离子强度分别为6.0和10 mmol/L，反应温度为室温，反应时间为1分钟。