[发明专利]禽减蛋综合症病毒新型基因工程疫苗、其制备方法与应用有效

专利信息
申请号: 201911022092.2 申请日: 2019-10-25
公开(公告)号: CN112708637B 公开(公告)日: 2022-06-24
发明(设计)人: 曹文龙;孔迪;滕小锘;易小萍;张大鹤 申请(专利权)人: 苏州世诺生物技术有限公司
主分类号: C12N15/866 分类号: C12N15/866;C07K14/075;C12N15/34;G01N33/569;A61K39/235;A61P31/20
代理公司: 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 代理人: 王茹
地址: 215123 江苏省苏州*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 禽减蛋 综合症 病毒 新型 基因工程 疫苗 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种抗原蛋白的制备方法,其特征在于包括:

将重组禽减蛋综合症病毒Core蛋白及Fiber蛋白的编码基因克隆到穿梭载体上,得到第一重组穿梭载体;

将重组禽减蛋综合症病毒Penton蛋白及Hexon蛋白的编码基因克隆到穿梭载体上,得到第二重组穿梭载体;

分别将第一重组穿梭载体、第二重组穿梭载体转化感受态宿主细胞,获得第一重组杆状病毒载体、第二重组杆状病毒载体;

利用所述第一重组杆状病毒载体、第二重组杆状病毒载体转染昆虫细胞,获得重组杆状病毒;

以所述重组杆状病毒共同接种昆虫细胞,并表达抗原蛋白;

其中,重组Core蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO:1所示,重组Fiber蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO:3所示,重组Penton蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO:5所示,重组Hexon蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO:7所示。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述感受态宿主细胞为DH10Bac菌。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述昆虫细胞选自Sf9、High-Five、S2或Sf21细胞。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述穿梭载体选自pFastBac Dual、pAcVC2、pAcUW51或pAcDB3。

5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述重组Core蛋白的序列如SEQ IDNO:2所示,所述重组Fiber蛋白的序列如SEQ ID NO:4所示,所述重组Penton蛋白的序列如SEQ ID NO:6所示,所述重组Hexon蛋白的序列如SEQ ID NO:8所示,所述重组Core蛋白、重组Fiber蛋白、Penton蛋白与Hexon蛋白能够自动组装形成病毒样颗粒。

6.由权利要求1-5中任一项所述方法制备的抗原蛋白。

7.一种蛋白组合物,其特征在于包括重组禽减蛋综合症病毒Core蛋白、Fiber蛋白、Penton蛋白及Hexon蛋白,其中重组Core蛋白的序列如SEQ ID NO:2所示,重组Fiber蛋白的序列如SEQ ID NO:4所示,重组Penton的序列如SEQ ID NO:6所示,重组Hexon蛋白的序列如SEQ ID NO:8所示。

8.根据权利要求7所述的蛋白组合物,其特征在于:所述重组Core蛋白、重组Fiber蛋白、Penton蛋白与Hexon蛋白能够组装形成病毒样颗粒。

9.一种核酸组合物,其特征在于包括重组禽减蛋综合症病毒Core蛋白、Fiber蛋白、Penton蛋白及Hexon蛋白的编码基因;其中,重组Core蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO:1所示,重组Fiber蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO:3所示,重组Penton蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO:5所示,重组Hexon蛋白的编码基因的序列如SEQ ID NO:7所示。

10.一种免疫组合物,其特征在于包含:权利要求6所述的抗原蛋白或者权利要求7或8所述的蛋白组合物;以及,药物学上可接受的佐剂。

11.如权利要求6所述的抗原蛋白、权利要求7或8所述的蛋白组合物、权利要求9所述的核酸组合物或者权利要求10所述的免疫组合物在制备用于在受试动物中诱导针对禽减蛋综合症病毒抗原的免疫反应的药剂或者用于预防动物受禽减蛋综合症病毒感染的药剂中的用途。

12.如权利要求6所述的抗原蛋白、权利要求7或8所述的蛋白组合物或者权利要求10所述的免疫组合物在制备禽减蛋综合症病毒新型基因工程疫苗中的用途。

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