[发明专利]一种含有多个半胱氨酸的RGD肽的纯化方法

权利要求书

1.一种含有多个半胱氨酸的RGD肽的纯化方法，其特征在于：包括多肽的溶解、反相色谱柱分析和反相制备色谱柱吸附及洗脱收集的步骤；

所述溶解的步骤包括将RGD肽溶于溶剂中得到多肽溶液；

所述反相色谱柱分析的步骤包括将所述多肽溶液接反相色谱分析柱进行梯度检测，得到分析图谱；

所述反相制备色谱柱吸附及洗脱收集包括以下步骤：

(1)根据所述分析图谱设置制备色谱柱的制备梯度；

(2)将RGD多肽溶液接制备色谱柱进行进样吸附并洗脱收集；

色谱条件为：浓度为0.05-0.2％三氟乙酸水溶液A液和甲醇B液 ；0到60min，A:B由96:4到70:30；流速20mL/min；流动相需要脱除氧气，并充入氮气；

所述RGD肽为具有-RGD-系列氨基酸的多肽，含有2个以上的半胱氨酸；并分别具有如下的氨基酸序列：

SEQ ID No .1:CCRGDKGPDCDisulfide Bridge:C2-C10、或SEQ ID No .2:CRGDRGPDC、或SEQ ID No .3:CRGDRGCFGCG-吉西他滨；

所述溶剂为水、乙腈、甲醇、异丙醇和二甲基亚砜中的一种或几种；

所述溶剂含有巯基乙醇；

所述梯度检测的检测器为紫外检测器，且检测波长220nm；所述反相制备色谱柱为C18柱。