[发明专利]一种利用淀粉生产甲萘醌-7的方法

权利要求书

1.一种利用淀粉生产甲萘醌-7的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将出发芽孢杆菌接种于种子培养基中，在最适温度下进行培养，测定出发芽孢杆菌在最适生长温度下的比生长速率χ₀，即μ=χ₀；

（2）将步骤（1）中生长至对数生长中后期的出发芽孢杆菌接种至新鲜种子培养基中，并在40-42℃ 进行培养，测定菌株在40-42℃ 下的比生长速率μ=χ₁；进一步将上述生长至对数生长中后期的菌株接种至新鲜种子培养基中，并在40-42℃ 进行培养，测定菌株在40-42℃ 下的比生长速率μ=χ₂；重复上述步骤，直至菌株在40-42℃ 下比生长速率μ≈χ₀，得到在40-42℃ 下正常生长的突变菌株；

（3）采用步骤（2）相同方法，以步骤（2）得到的在40-42℃ 下正常生长的突变菌株为出发菌株，诱导在44-46℃ 下正常生长的突变菌株；

（4）采用步骤（2）相同方法，以步骤（3）得到的在44-46℃ 下正常生长的突变菌株为出发菌株，诱导在48-52℃ 下正常生长的突变菌株；

（5）利用步骤（4）得到的在48-52℃ 下正常生长的突变菌株，以淀粉作为唯一碳源，发酵生产甲萘醌-7；

所述的芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤（1）或步骤（2）中，所述的培养是在100-150r/min转速下培养。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤（2）中，接种的接种量为1-2%。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤（5）中，所述的发酵的具体步骤为：将在48-52℃ 下正常生长的突变菌株单菌落接种至种子培养基中培养至对数期，将种子培养液转接至SYS培养基进行发酵生产甲萘醌-7；

所述的SYS培养基为：45-55 g/L 可溶性淀粉，8-12 g/L 酵母膏，35-45 g/L 豆粕水解液，0.3-0.7 g/L MgSO₄，0.3-0.7 g/L KH₂PO₄，0.4-0.5 g/L 异戊烯醇，pH 6-8。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的种子培养基为：3-7 g/L 蛋白胨，2-3 g/L 酵母膏，3-7 g/L 葡萄糖，pH 6-8。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，种子培养阶段的培养条件为：培养温度为48-52℃，转速为100-150r/min，培养时间为20-25 h。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，将种子培养液转接至SYS培养基的接种量为5-15%。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，发酵阶段的培养条件为：培养温度为48-52℃，转速为100-150r/min，培养时间为5-8d。