[发明专利]一种番鸭呼肠孤病毒同居感染发病模型及其构建方法

权利要求书

1.一种番鸭呼肠孤病毒同居感染发病模型，其特征在于，所述番鸭呼肠孤病毒同居感染发病模型用10⁶TCID₅₀番鸭呼肠孤病毒YB分离株每羽人工腿部肌肉注射感染实验雏番鸭，注射感染发病的雏番鸭作为传染源放入易感的实验雏番鸭群模拟该病毒的自然感染途径进行感染发病。

2.一种如权利要求1所述番鸭呼肠孤病毒同居感染发病模型的构建方法，其特征在于，所述番鸭呼肠孤病毒同居感染发病模型的构建方法包括以下步骤：

步骤一，用10⁶TCID₅₀番鸭呼肠孤病毒YB分离株腿部肌肉注射感染实验雏番鸭，感染发病后，把人工肌注感染的雏番鸭混入待感染实验雏番鸭进行同居感染；

步骤二，观察实验同居感染雏番鸭MDRV感染的病程发展过程、临床症状、剖检病变、发病率、病死率情况。

3.如权利要求2所述的番鸭呼肠孤病毒同居感染发病模型的构建方法，其特征在于，所述番鸭呼肠孤病毒同居感染发病模型的构建方法包括以下步骤：

步骤一，将520羽1日龄MDRV抗原抗体双阴的健康雏番鸭随机分Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组和VII组，其中Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组为同居感染MDRV实验组，每组75羽，四组均再随机分为3个临床症状观察重复小组(每组15羽)和1个剖检病变观察组(30羽)；Ⅴ组为人工腿部肌肉注射感染MDRV对照组，75羽随机分为3个临床症状观察重复小组(每组15羽)和1个剖检病变观察组(30羽)；Ⅵ组为空白对照组，45羽随机分为临床症状观察组(15羽)和剖检观察组(30羽)；VII组为人工腿部肌肉注射感染MDRV制备传染源组，100羽；VII组雏番鸭2日龄时每只腿部肌肉注射10⁶TCID₅₀MDRV-YB分离株进行感染，3天后(雏番鸭5日龄)，注射感染发病雏番鸭分别以2:15、4:15、6:15、8:15的比例加入Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组的各小组雏番鸭群进行同居感染MDRV；同时Ⅴ组雏番鸭5日龄时每羽腿部肌肉注射10⁶TCID₅₀ MDRV-YB分离株进行感染；Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组实验雏番鸭独立分开饲养管理，饲喂雏鸭全价饲料，自由饮水采食；

步骤二，观察实验同居感染雏番鸭MDRV感染的病程发展过程、临床症状、剖检病变、发病率、病死率情况；

(1)确定番鸭呼肠孤病毒病自然感染发病模型的标准；

(2)临床观察实验期间每日进行临床观察，记录Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的临床症状观察组实验雏番鸭的临床症状，统计并比较各组发病情况；

(3)剖检观察在2dpi、3dpi、4dpi、5dpi、6dpi、9dpi、12dpi、15dpi，Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组的剖检病变观察组每组随机抽取3羽实验雏番鸭，心脏采血处死后剖杀，观察并记录各组肝脏、脾脏、胸腺和法氏囊器官的肉眼变化；对实验过程中发病死亡的雏番鸭做同样处理。

4.一种由权利要求1所述番鸭呼肠孤病毒同居感染发病模型得到的防治番鸭呼肠孤病毒感染的药物，其特征在于，所述防治呼肠孤病毒感染的药物为猴头菇多糖HEP；猴头菇多糖是猴头菇子实体经干燥粉碎过30目后，采用热水提取、乙醇沉淀，经离子交换树脂柱分离纯化获得，高效液相色谱分析结果表明猴头菇多糖由葡萄糖51.02％、半乳糖42.24％、甘露糖4.5％和阿拉伯糖2.2％组成。HEP是猴头菇中重要的生物活性物质，兼具提高免疫力、抗肿瘤、保护并修复胃肠黏膜和保肝护肝作用。