[发明专利]一种解磷菌及其提取方法在审

专利信息
申请号: 201911035129.5 申请日: 2019-10-29
公开(公告)号: CN110669696A 公开(公告)日: 2020-01-10
发明(设计)人: 耿雪青;曹建明;赵宇;刘思岑 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N1/02;C12Q1/04;C12R1/38
代理公司: 31236 上海汉声知识产权代理有限公司 代理人: 胡晶
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 菌株 解磷能力 解磷菌 阴性 硝酸钾 革兰氏染色阴性 假单胞菌属细菌 硫酸铵 生化指标测定 葡萄糖 乳糖 过氧化氢酶 氧化酶试验 反应阴性 柠檬酸盐 强弱顺序 试验阴性 液化明胶 吲哚试验 半乳糖 胞外酶 甲基红 氯化铵 明胶酶 生长 蔗糖 氮源 可溶 吲哚 淀粉 尿素
【说明书】:

发明公开了一种解磷菌及其提取方法,解磷菌名称为B5菌株,B5菌株为假单胞菌属细菌;其生化指标测定结果为:革兰氏染色阴性,甲基红试验阴性,V‑P反应阴性,吲哚试验阴性,氧化酶试验阴性,菌株B5可以利用柠檬酸盐为碳源,产生胞外酶‑明胶酶液化明胶、产生过氧化氢酶、吲哚、且生成H2S;B5菌株在不同碳源下解磷能力强弱顺序为:葡萄糖>半乳糖>乳糖>蔗糖>可溶磷淀粉,在不同氮源下解磷能力顺序为硫酸铵>氯化铵>尿素>硝酸钾;B5菌株最适生长温度为28~32℃,B5菌株最适生长pH为7~9。

技术领域

本发明属于农业生物技术领域,尤其涉及一种解磷菌及其提取方法。

背景技术

植物从土壤中获取磷素是为提供自身生长所需磷素的主要途径之一。然而土壤中磷含量虽为0.05%(w/w),但其中仅0.1%的可溶性磷可以被植物吸收,土壤中磷素吸收的磷素含量远达不到植物生长所需磷含量。在农业生产过程中,土壤中的磷素极易与土壤成分形成难溶磷酸盐和络合物,导致植物可利用的土壤磷素较少,对磷肥的利用率也较低,因此作物的生长受到严重抑制。不仅如此,大量的施用磷肥会使土壤肥力退化,尤其是耕作的土壤,扰乱了微生物多样性与其活性,从而导致农作物减产。再者磷肥的制作主要从不可再生的磷矿石中分离,全球的磷矿石资源在50~100年将被耗尽。解磷菌是一类可以将难溶性磷转化为能被植物吸收的有效磷的微生物,可以改善植物生长的磷素营养,有效的促进了植物的生长,提高农作物的产量。

截止目前,文献报道的解磷菌典型资源类群有:芽孢杆菌属(Bacillus)、埃希氏菌属(Escherichia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、欧文氏菌属(Erwinia)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、肠细菌属(Enterbacter)、黄杆菌属(Flavobacterium)、沙门氏菌属(Salmonella)、沙雷氏菌属(Serratia)、微球菌属(Micrococcus)、固氮菌属(Azotobacter)、色杆菌属(Chromobacterium)、多硫杆菌属(Thiobacillus)、产碱菌属(Alcaligenes)等;解磷放线菌绝大部分为链霉菌属(Streptom);解磷真菌主要是曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)和根霉属(Rhizopus)。随着研究工作的不断积累,将会有更多高活性解磷菌株被发现。

从已有的文献报道来看,解磷菌种类分布的比较广泛,而且解磷能力较强的种类并不十分集中,换句话来说,也就是不同类群的菌种资源都有可能存在解磷活性较高的菌株,从这个角度看,具有解磷能力野生菌株的筛选工作仍然意义重大,十分必要。

在不同土壤中的解磷菌的解磷能力不同,新疆多内陆地区和国外进口菌种,但由于对本地环境的不适应,多数菌剂不能发挥效用。

发明内容

本发明的目的是提供一种解磷菌及其提取方法、应用,不仅可以丰富野生解磷菌遗传资源,扩大解磷菌全基因组育种的后备库,而且可以为新疆的土地提供一种生物磷肥,可以更好的实现解磷菌的解磷能力。

为解决上述问题,本发明的技术方案为:

一种解磷菌,所述解磷菌名称为B5菌株,所述B5菌株为假单胞菌属细菌;

其生化指标测定结果为:革兰氏染色阴性,甲基红实验试性,V-P反应阴性,吲哚试验阴性,氧化酶试验阴性,菌株B5可以利用柠檬酸盐为碳源,产生胞外酶-明胶酶液化明胶、产生过氧化氢酶、吲哚、且生成H2S;

所述B5菌株在不同碳源下解磷能力强弱顺序为:葡萄糖>半乳糖>乳糖>蔗糖>可溶磷淀粉,在不同氮源下解磷能力顺序为硫酸铵>氯化铵>尿素>硝酸钾;所述B5菌株最适生长温度为28~32℃,所述B5菌株最适生长pH为7~9。

本发明还提供了一种上述解磷菌的提取方法,包括以下步骤:

S1:土壤采样:采集于新疆昌吉市室外土壤,采集地面5cm下的土壤样品;

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