[发明专利]一种海参皂苷Cladoloside A的提取方法

权利要求书

1.一种海参皂苷Cladoloside A的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)选取新鲜仿刺参经解剖去内脏后粉碎，得到仿刺参糜肉，加入80％的乙醇水溶液进行回流提取，提取3次，提取液趁热过滤，收集滤液进行浓缩回收，得浓缩浸膏为总提取物；

(2)将步骤(1)中得到的总提取物，均匀分散在水中，过大孔树脂柱进行梯度洗脱，洗脱顺序为水、80％乙醇，经薄层色谱分析，收集80％乙醇的洗脱液；

(3)将步骤(2)中得到的80％乙醇洗脱液回收，进行浓缩，得海参总皂苷提取物；

(4)将步骤(3)中得到的海参总皂苷提取物通过正向硅胶柱，用不同比例的氯仿、甲醇和水作为洗脱溶剂进行梯度洗脱，氯仿：甲醇：水的体积比依次为10:1:0.1、9:1:0.1、4.5:1:0.1、4:1:0.1、3:1:0.1、2:1:0.1、1:1:0.1；洗脱液经过薄层色谱分析，选取含量大的部分进一步通过两次反向硅胶柱层析进行分离纯化，两次反向硅胶柱层析的洗脱溶剂依次分别为体积比为5:1的甲醇和水以及体积比为1:1的甲醇和水；浓缩后得到海参皂苷Cladoloside A；所述正向硅胶柱中填料的粒度为200-300目，反向硅胶柱中填料的粒度为50μm。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤(1)中仿刺参糜肉与80％的乙醇水溶液的质量比为1：7，提取的时间分别为2小时、1.5小时和0.5小时，滤液浓缩的方式为真空旋转浓缩，浓缩的温度为40℃。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤(2)中大孔树脂层析柱中的大孔树脂填料的粒度为0.3-1.25mm。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤(2)中总提取物与大孔树脂的质量比为1：7-1：8。

5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤(2)中大孔树脂洗脱中的洗脱溶剂为大孔树脂质量的6-7倍，洗脱流速为每小时1个柱床体积。

6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤(2)中薄层色谱展开剂为氯仿、甲醇和乙酸乙酯，其中氯仿：甲醇：乙酸乙酯的体积为9：3：2；步骤(4)中薄层色谱展开剂为氯仿、甲醇和水，其中氯仿：甲醇：水的体积为4：1：0.1。

7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤(3)和步骤(4)中浓缩的方式均为真空旋转浓缩，浓缩的温度均为40℃。