[发明专利]一种阿加曲班降解杂质及其制备方法

说明书

本发明涉及一种阿加曲班降解杂质及其制备方法，所述杂质为(2R,4R)‑4‑甲基‑1‑[N’‑((R,S)‑3‑甲基‑1,2,3,4‑四氢‑8‑喹啉磺酰基‑L‑瓜氨酰基]‑2‑哌啶甲酸，其制备方法包括，以L‑瓜氨酸作为原料，与2R,4R‑哌啶甲酸乙酯进行缩合反应，再与3‑甲基‑8‑喹啉磺酰氯在有机碱的作用下进行缩合反应，得到中间体2；中间体2在钯碳的催化下加氢还原，进一步在碱水醇溶液中进行水解反应，进过柱纯化得到。

技术领域

本发明涉及一种医药用途的化合物及其制备方法，特别涉及抗凝血药物阿加曲班的降解杂质化合物I的制备，应用以及检测。

背景技术

阿加曲班(Argatroban)分子结构式如下式所示：

化学名称为(2R,4R)-4-甲基-1-[N-[((R,S)-3-甲基-1,2,3,4-四氢-8-喹啉)磺酰基]-L-精氨酸]-2-哌啶甲酸，分子式为C₂₃H₃₆N₆O₅S，相对分子质量为508.63，CAS 登记号为74863-84-6，阿加曲班是由日本三菱制药株式会社最早研发的一种新型凝血酶抑制剂，可逆地与凝血酶活性位点结合，可用于缺血性脑梗死急性期病人的抗凝治疗。美国食品药品管理局(FDA)在2000年批准了SmuhKline Beecham 和Texas Bitechnology的可注射抗血栓小分子药物阿加曲班应用于治疗和预防血栓形成及肝素诱导的免疫性疾病一血小板减少症及用于对需要进行经皮冠脉介入术病人的治疗。2003年3月5日在美国中风学会第28届国际中风大会上公布的多中心二期临床试验结果表明阿加曲班在急性缺血性中风治疗中的疗效安全性显著。2011年5月10日，美国食品药品管理局(FDA)己批准阿加曲班注射液——即用型产品用于预防或治疗血栓，适用人群为肝素引起的血小板减少症患者。阿加曲班注射液也作为抗凝药用于合并肝素引起的血小板减少症或高危的经皮冠脉介入患者。

在已报道的文献中，阿加曲班的主要合成路线分为两种：

1.以N-硝基-L-BOC-精氨酸为起始原料，与(2R,4R)-哌啶甲酸乙酯进行缩合反应，再脱除BOC保护基；与3-甲基-8-喹啉磺酰氯反应进行缩合反应，再经水解、高压氢化得到阿加曲班成品。其路线图如下式所示：

2.以N-硝基-L-精氨酸先与3-甲基-8-喹啉磺酰氯进行缩合反应，然后在三氯氧磷的作用下与(2R,4R)-哌啶甲酸乙酯进行缩合，再经过乙酯水解及高压氢化反应最终得到阿加曲班成品，其合成路线图如下式所示：

杂质是药品的一项关键质量属性，在整个化学药研发流程中属于重点研究对象。其中降解杂质指的是原料药和制剂在生产和贮藏过程中发生化学变化而产生的杂质，某些工艺杂质同时也有可能是降解杂质。

在阿加曲班日本药品说明书中的Interview Form文件(简称IF文件)中公开了阿加曲班的一个碱降解杂质，其化学结构式如下式所示：

本发明人根据现有合成技术得到了阿加曲班原料药样品，通过对阿加曲班进行强制降解试验发现，其在酸、碱条件下均不稳定，其溶液在紫外照射下也很容易发生降解。本发明人经过研究发现，在阿加曲班原料药样品中还有一个含量较低的新的降解杂质，本发明人经过对碱破坏溶液进行LC-MS检测，检测到其分子量为509，随后对反应液进行浓缩后，进行高压制备分离纯化得到少量该目标产物的样品，经过H-NMR图谱的解析，综合质谱信号，分析判断该产物为一种新结构的化合物，其结构式为：

工艺杂质是原料药和制剂质量研究的关键因素之一。为更好的进行阿加曲班质量研究，非常有必要得到相应杂质的标准品，以便对其进行相应的检测，并将其控制在一个安全、合理的限度范围内，从而提高和控制阿加曲班的质量及安全性。