[发明专利]一种分离培养间充质干细胞的方法

权利要求书

1.高温诱导在缩短从组织中分离间充质干细胞所需的时间中的用途，其中，所述高温诱导为将含有间充质干细胞的组织置于38～39℃的温度下诱导1小时，所述组织为人脐带或人脂肪组织。

2.高温诱导在提高从组织中分离间充质干细胞的效率中的用途，其中，所述高温诱导为将含有间充质干细胞的组织置于38～39℃的温度下诱导1小时，所述组织为人脐带或人脂肪组织。

3.高温诱导在增强传代过程中间充质干细胞增殖效率中的用途，其中，所述高温诱导为将含有间充质干细胞的组织置于38℃的温度下诱导1小时，所述组织为人脐带或人脂肪组织。

4.高温诱导在提高间充质干细胞生物学效力中的用途，所述生物学效力是TNFRI分泌水平，其中，所述高温诱导为将含有间充质干细胞的组织置于38℃的温度下诱导1小时，所述组织为人脐带或人脂肪组织。

5.权利要求1-2任一项的用途，其中，诱导温度为38℃。

6.权利要求1-4任一项的用途，所述高温诱导包括以下步骤：分离含有间充质干细胞的组织，将该组织置于高温条件下诱导，随后在间充质干细胞培养液中培养该组织。

7.根据权利要求6的用途，在高温诱导后还包括在37℃下孵育的步骤，所述高温诱导和/或孵育在5％CO₂条件下进行。

8.根据权利要求7的用途，孵育时间为3～6小时。

9.根据权利要求8的用途，孵育时间为5小时。

10.根据权利要求1-4任一项的用途，其中，脐带组织不含脐带血，不去除任何固体成分，包括羊膜上皮、血管和华通氏胶成分，将脐带组织剪为直径为1～1.5mm的小段，不清洗，以便保留组织原有环境。

11.根据权利要求10的用途，其中，脐带组织在高温诱导和/或孵育中均不添加细胞培养液。

12.根据权利要求1-4任一项的用途，其中，脂肪组织去除血液，通过胶原酶将脂肪颗粒消化破碎后加入细胞培养液重悬浮。

13.根据权利要求1-4任一项的用途，其还包括采取以下一种或多种方式进行诱导：物理刺激，炎性细胞因子刺激，干细胞迁移相关蛋白刺激，缺氧刺激。

14.根据权利要求13的用途，其中，所述物理刺激为剪切或搅拌；炎性细胞因子为肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ或白细胞介素-1；干细胞迁移相关蛋白为CXCL12、G-CSF、SCF或PDGF-BB；缺氧刺激为20％O₂。