[发明专利]用中国仓鼠卵巢细胞表达外源蛋白时信号肽的选择方法及应用

权利要求书

1.用中国仓鼠卵巢细胞表达外源蛋白时信号肽的选择方法，其特征在于：首先选取能在中国仓鼠卵巢细胞中高分泌表达蛋白的信号肽作为待选择信号肽；将待选择信号肽分别与外源目的蛋白进行串联，在待选择信号肽与外源目的基因之间引入GGSSGG间隔子和不引入GGSSGG间隔子，获得重组蛋白；通过信号肽分析工具分析重组蛋白的氨基酸序列，选择切割位点分析准确且落在间隔子上的重组蛋白序列上的信号肽，即为适合外源目的蛋白外分泌表达的信号肽；

所述外源蛋白是指Gen Bank：QDJ95689.1的O型口蹄疫病毒VP1蛋白的21~60AA、141~160AA和200~213AA。

2.根据权利要求1所述的用中国仓鼠卵巢细胞表达外源蛋白时信号肽的选择方法，其特征在于：在所述外源目的蛋白含有多个表位时，在每两个相邻的表位之间引入GGSSGG间隔子。

3.权利要求1-2任意一种所述的信号肽的选择方法在中国仓鼠卵巢细胞分泌表达O型口蹄疫病毒重组表位蛋白中的应用，其特征在于：所述应用是利用所述信号肽的选择方法选择适合O型口蹄疫病毒重组表位蛋白表达的信号肽，包括以下步骤：

步骤一、选择Gen Bank：QDJ95689.1的O型口蹄疫病毒VP1蛋白的21~60AA、141~160AA和200~213AA作为优势表位；连接三个所述优势表位构建多表位基因表达盒；其中，在连接三个所述优势表位时在每两个相邻的优势表位之间引入GGSSGG间隔子；

步骤二、从已报道的文献中选取能有效分泌表达外源目的基因的信号肽作为待选择信号肽，将待选择信号肽分别与步骤一所得多表位基因表达盒连接，连接时在待选择信号肽和多表位基因表达盒之间分别选用引入GGSSGG间隔子和不引入GGSSGG间隔子两种连接方式，获取重组蛋白；

步骤三、使用信号肽分析工具分析步骤二所得重组蛋白的氨基酸序列，选择切割位点分析准确且落在间隔子上的信号肽，即为适合O型口蹄疫病毒蛋白表达的信号肽。