[发明专利]一种具有降血压活性的小麦蛋白肽及其制备方法

权利要求书

1.一种制备具有降血压活性的小麦蛋白肽的方法，包括如下步骤：

1）采用电解水预处理小麦谷朊粉；

制备所述电解水的电解溶液为0.1%的氯化钠溶液；

2）调节体系的pH值至8.0-9.5，搅拌，得到小麦谷朊粉混悬液；

3）依次采用碱性蛋白酶和铜绿假单胞菌来源蛋白酶分步酶解；

4）将步骤3）所得酶解液过滤、浓缩和喷雾干燥得到小麦蛋白肽粉。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1）中，所述电解水的pH值为：3.5-12.5；

所述小麦谷朊粉与电解水的比值为：50-200 g：1 L；

所述电解水预处理的时间为：4-8h。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤3）的操作为：向所述小麦谷朊粉混悬液中加入碱性蛋白酶，水解，加入铜绿假单胞菌来源蛋白酶，继续水解，两步水解后沸水浴灭活，冷却至室温，得到酶解液；

其中，所述碱性蛋白酶的加入量为500-1500 U每克小麦谷朊粉；

所述加入碱性蛋白酶后水解的时间为4-8h；

所述铜绿假单胞菌来源蛋白酶的加入量为：500-1000 U每克小麦谷朊粉；

所述继续水解的时间为4-8h；

所述水解和继续水解的温度均为40℃-60℃。

4.通过权利要求1-3中任一项所述的方法制备得到的小麦蛋白肽粉，所述小麦蛋白肽粉中分子量小于1000 Da的部分大于95%；

所述小麦蛋白肽粉的ACE体外半抑制浓度为0.21mg/mL；

所述小麦蛋白肽粉具有抗胃肠消化能力。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法还进一步包括从所得小麦蛋白肽粉中分离得到ACE抑制肽组分的操作；

所述操作为：将所述小麦蛋白肽粉用盐酸溶液溶解，离心处理，取上清液，进行凝胶层析，分离得到7个组分，依次记为F1组分、F2组分、F3组分、F4组分、F5组分、F6组分和F7组分；

其中，所述盐酸溶液的浓度为10mM；

所述离心的条件为在10000r/min条件下离心10min；

采用凝胶层析，色谱条件：AKTApurifierUPC-900快速蛋白液相色谱仪；色谱柱尺寸为1000×10mm，柱料为葡聚糖凝胶G-15；流动相：10mM的盐酸溶液；流速：0.8mL/min；检测：UV280nm；

F6组分为洗脱时间在127.5-170 min的流出液；

F7组分为洗脱时间在170-212.5 min的流出液。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法还进一步包括从F7组分中分离鉴定得到肽段SAGGYIW和APATPSFW的操作；

所述操作为：对F7组分进行nanoLC-MS/MS分析，从中鉴定得到肽段SAGGYIW和APATPSFW。

7.权利要求5所述方法分离得到的ACE抑制肽组分F6组分和F7组分；其中，F7组分的ACE半抑制浓度为0.035mg/mL。

8.ACE抑制肽段SAGGYIW，其体外ACE半抑制浓度为2.65μM，或，ACE抑制肽段APATPSFW，其体外ACE半抑制浓度为41.1μM。

9.权利要求1-3任一项所述方法制备的小麦蛋白肽、权利要求4所述的小麦蛋白肽、权利要求7所述的F6组分及F7组分或权利要求8所述的肽段SAGGYIW或肽段APATPSFW在制备降血压的药物或预防和/或治疗高血压的药物中的应用。

10.一种降血压的药物或预防和/或治疗高血压的药物，含有权利要求1-3任一项所述方法制备的小麦蛋白肽、权利要求4所述的小麦蛋白肽、权利要求7所述的F6组分及F7组分以及权利要求8所述的肽段SAGGYIW和肽段APATPSFW中的至少一种。