[发明专利]一种红斑丹毒丝菌的检测方法及其引物和探针

权利要求书

1.一种检测红斑丹毒丝菌的引物，其特征在于，所述引物的序列为：

F-引物：5’-CCGAATTTGCTTACCGCTTGAAGGTTAAAGCAGGC-3’，

R-引物：5’-GTCCAAATTGAATAGTTTTCTATATACATAAGATC-3’。

2.一种检测红斑丹毒丝菌的探针，其特征在于，所述探针的序列为：

探针：5’-AGGTCTAGCGCAGATCGAGGGTAAGTACAATAATCTCCAAAAGATAA-3’；

所述探针上标记有荧光基团、淬灭基团和THF，所述荧光基团与所述淬灭基团均标记在T碱基上，所述荧光基团与所述淬灭基团的间距为1～5nt；所述荧光基团与所述淬灭基团之间设有所述THF，所述THF距所述探针5’端≥30nt，所述THF距所述探针3’端≥15nt。

3.根据权利要求2所述的探针，其特征在于，所述荧光基团包括FAM、TET、HEX、CY3或JOE，所述淬灭基团包括BHQ1、BHQ2、TAMRA、DABCYL、MGB或Eclipse。

4.根据权利要求2所述的探针，其特征在于，所述探针的3’末端还标记有修饰基团。

5.根据权利要求4所述的探针，其特征在于，所述修饰基因包括胺基、磷酸基团、生物素-TEG、巯基或C3-spacer。

6.一种用于检测红斑丹毒丝菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物和权利要求2至5中任一项所述的探针。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性标准品和阴性标准品。

8.一种非诊断目的的红斑丹毒丝菌的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取样品DNA；

(2)以所述样品DNA为模板，利用权利要求1所述的引物和权利要求2至5中任一项所述的探针进行实时荧光重组酶介导核酸扩增检测；

(3)收集荧光信号，得出样品检测结果。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述样品DNA的OD260/280为1.8～2.0。

10.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述RAA检测的反应程序为：39℃40s，1个循环；39℃30s，30～40个循环。