[发明专利]一种同时检测血浆中ACC007、拉米夫定和替诺福韦的方法

权利要求书

1.一种同时检测血浆中ACC007、拉米夫定和替诺福韦的方法，其特征在于，采用高效液相色谱串联质谱技术检测经预处理的血浆样品，利用内标法定量，以ACC007、拉米夫定、替诺福韦标准样品的浓度为X轴，以标准样品与内标的峰面积比值为Y轴，建立标准曲线方程，将ACC007、拉米夫定和替诺福韦与内标峰面积的比值代入标准曲线，计算得到ACC007、拉米夫定和替诺福韦的浓度；具体色谱-质谱条件为：

(1)高效液相色谱条件：

流动相A：10nM醋酸铵含0.1％甲酸；

流动相B：甲醇；

柱温：40℃；

流速：0.4mL/min；

采用梯度洗脱方式，梯度见表1：

表1流动相梯度表

(2)质谱条件：

采用电喷雾电离源(ESI)，正离子扫描(高灵敏度模式)方式检测，GAS1：55psi，GAS2：55psi，Curtain GAS：30psi，源温度为450℃，多离子反应检测(MRM)，具体的离子信息见表2：

表2质谱监测的参数

2.根据权利要求1所述的同时检测血浆中ACC007、拉米夫定和替诺福韦的方法，其特征在于，所述血浆为人或动物的血浆。

3.根据权利要求1所述的同时检测血浆中ACC007、拉米夫定和替诺福韦的方法，其特征在于，以甲苯磺丁脲为内标，所述内标工作溶液为含甲苯磺丁脲的甲醇。

4.根据权利要求1所述的同时检测血浆中ACC007、拉米夫定和替诺福韦的方法，其特征在于，所述血浆样品预处理方法如下：取血浆25μL，加入100μL含内标甲苯磺丁脲500nM的甲醇，涡流1min后沉淀蛋白，13000rpm离心10min后，定量吸取20μL上清液加入80μL去离子水，涡流1min即得。

5.根据权利要求1所述的同时检测血浆中ACC007、拉米夫定和替诺福韦的方法，其特征在于，所述标准曲线的建立方法如下：取空白血浆，配制成相当于ACC007、拉米夫定、替诺福韦血浆浓度为10、20、40、50、80、100、200、400、500、800、1000、2000ng/mL的标准系列样品，按血浆样品预处理方法进行操作，建立ACC007、拉米夫定、替诺福韦的标准曲线，ACC007线性范围为10ng/mL到2000ng/mL，拉米夫定和替诺福韦线性范围为20ng/mL到2000ng/mL，以待分析物浓度为横坐标(X)，待分析物与内标甲苯磺丁脲的峰面积比值为纵坐标(Y)，其中ACC007和替诺福韦用加权(W＝1/X²)最小二乘法进行回归运算，拉米夫定用Power曲线回归，求得直线回归方程即为标准曲线。