[发明专利]一种测定饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂含量的方法

说明书

本发明公开了一种测定饲料中β‑阿朴‑8＇‑胡萝卜素酸乙酯着色剂含量的方法，包括：(1)预处理，称取待测饲料样品，加入水、饱和氯化钠、0.05％乙酸溶液、混合提取液涡旋混合后离心，吸取上层萃取液；用甲基叔丁基醚+乙腈溶液溶解残渣，过滤得供试样品溶液；(2)液相色谱仪分析，测定β‑阿朴‑8＇‑胡萝卜素酸乙酯着色剂的峰面积；(3)利用β‑阿朴‑8＇‑胡萝卜素酸乙酯线性回归方程计算待测饲料中β‑阿朴‑8＇‑胡萝卜素酸乙酯着色剂的质量浓度，再计算待测饲料中β‑阿朴‑8＇‑胡萝卜素酸乙酯着色剂的含量。本发明方法具有简单、快速、准确、灵敏的特点，适用于饲料中β‑阿朴‑8＇‑胡萝卜素酸乙酯着色剂含量的检测分析。

技术领域

本发明涉及一种测定饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂含量的方法，属于β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂含量检测技术领域。

背景技术

我国《中华人民共和国农业部公告》第2625号中明确规定配合饲料中β-阿朴-8＇-β,β-胡萝卜素-4,4-二酮(斑蝥黄)的最高限量为80mg/kg。目前我国对饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂检测尚无国家标准和行业标准方法，造成饲料中着色剂的检测空白，增加了饲料产品质量安全风险和监管的不利。特别是在肉禽、蛋禽养殖过程中，养殖户和企业为了迎合消费者心理，追求外观色泽漂亮，肉鸡膘黄、脚黑，鸡蛋心红、亮，添加着色剂来改变色泽充当土鸡、土鸡蛋来追求高回报已为常态。着色剂在禽肉、禽蛋中大量蓄积、残留，增加了消费者的健康危害风险。

β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯又叫阿朴胡萝卜素酸乙酯或阿朴酯，是类胡萝卜素中一种含氧的阿朴胡萝卜素类化合物。在食品工业中主要应用于食用油、人造奶油、果酱、果冻及饮品类产品的着色。目前在对饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂的检测中，由于样品中脂类和蛋白对结果的干扰，以及β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂本身不稳定的因素，使得饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂检测存在准确性差、灵敏度低、分析速度慢等问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种灵敏度高、准确性好、分析速度快的测定饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂含量的方法，通过合理的样品提取和净化条件，以解决现有技术存在的样品中脂类和蛋白对检测结果的干扰，以及待测物β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂不稳定的问题。

本发明的技术方案是：一种测定饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂含量的方法，包括：

(1)预处理

称取待测饲料样品，加入水、饱和氯化钠、0.05％乙酸溶液、混合提取液涡旋混合后离心，吸取上层萃取液；

用混合提取液重复萃取，所述混合提取液为甲醇：乙酸乙酯：正己烷的混合溶液；

合并萃取液，加入无水乙醇，混匀；在氮气下吹干；

用甲基叔丁基醚+乙腈溶液溶解残渣，过滤得供试样品溶液；

(2)液相色谱仪分析

将所述供试样品溶液上液相色谱仪进行分析，测定β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂的峰面积；

(3)计算饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂的含量

利用多组已知质量浓度的β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯溶液测定β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯峰面积，以β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯质量浓度为横坐标，相应峰面积为纵坐标进行线性回归，建立β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯线性回归方程；

根据前述待测饲料样品的β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯峰面积，利用β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯线性回归方程计算待测饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂的质量浓度，再计算待测饲料中β-阿朴-8＇-胡萝卜素酸乙酯着色剂的含量。