[发明专利]一种补体C3c的检测试剂盒及制备方法

说明书

一种补体C3c的检测试剂盒，其特征在于：包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包括：第一缓冲液A、第一缓冲液B、氯化钠、PEG6000、螯合剂和防腐剂。试剂R2包括偶联缓冲液、抗体偶联物以及保存液。本发明的优点是：本发明采用将生物素结合补体C3c抗体比例为1:1‑3:1连接，再与链霉亲和素二者1:1混合反应，并且在R1试剂中加入螯合剂，可明显改善检测试剂的重复性和灵敏度，线性范围可做到1‑250mg/L，可广泛应用大、中、小医院。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种补体C3c的检测试剂盒及制备方法。

背景技术

C3是血清中含量最高的补体成分，分子量为195000，主要有巨噬细胞和肝脏合成，在C3转化酶的作用下,C3分子裂解成C3a和C3b，C3b受血清中I因子、H因子和蛋白酶的作用,又可逐级水解为C3b,C3f,C3c,C3dg。补体C3c的动态变化在临床上越来越受到重视，其升高或降低与很多疾病如胃炎、红斑狼疮病情恶化以及传染病及组织损伤和急性炎症等都有着密切的联系。因此，补体C3c的检测越来越受到重视。

常规的补体C3c的检测试剂盒的直接采用补体C3c抗体与抗原反应，我司采用该方法发现灵敏度、重复性和线性范围均较差存在着灵敏度和线性范围均较差的缺陷，限制了它的应用。因此，应该提供一种新的技术方案解决上述问题。

发明内容

本发明的目的是：提供一种稳定性好、灵敏度高、线性范围宽的补体C3c的检测试剂盒及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种补体C3c的检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1的各组分及浓度包括：

所述试剂R2包括偶联缓冲液、抗体偶联物以及保存液，所述偶联缓冲液的主要组分及浓度为：

2-(N-吗啉)乙磺酸一水合物 8-27g/L

所述保存液的各组分及浓度包括：

N,N-二羟乙基甘氨酸 1.3-9.8g/L

稳定剂 0.5-2g/L

防腐剂 0.8-2.0ml/L

所述抗体偶联物的各组分及浓度包括：

生物素 5-20g/L

链霉亲和素 5-20g/L

补体C3c抗体 0.05-3.0g/L

1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐0.05-0.3g/L。

进一步的技术方案：

所述试剂R1中的第一缓冲液A、第一缓冲液B分别为PBS缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液中的一种或两种以上混合物。

所述试剂R1、R2中的防腐剂分别为叠氮钠、Proclin950、Proclin300、硫柳汞中的一种或两种以上混合物。

所述试剂R2中的稳定剂为酪蛋白、甘露醇、牛血清白蛋白中的一种或两种以上混合物。

所述试剂R1中的螯合剂为EDTA-2Na、焦磷酸钠、柠檬酸钠、酒石酸钾钠、葡萄糖酸钠中的中的一种或两种以上混合物。