[发明专利]一种脂肪酶试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种脂肪酶试剂盒及其制备方法，包括试剂R1、试剂R2和试剂R3，所述试剂R1包括下述原料：80～120mmol/l酒石酸缓冲溶液（pH为7.0）；3.0～5.0mmol/l牛磺脱氧胆酸；0.05‑0.08mmol/l苯丁酸；450～550KU/l共脂肪酶；10‑15mmol/l氯化钙；2.0‑3.0mmol/l脱氧胆酸；所述试剂R2包括下述原料：80～120mmol/l酒石酸缓冲溶液（pH为7.0）；0.5～1.0mmol/l表面活性剂；0.2～0.8mmol/蛋白变性剂；2.0‑3.0mmol/l乙醚；所述试剂R3包括下述原料：80～120mmol/l酒石酸缓冲液（pH为7.0）；0.15～0.35mmol/l6‑甲基试卤灵酯；3.0～5.0mmol/l牛磺脱氧胆酸。提供一种持续性灵敏度高，检测精度高，反应一段时间后，能够持续维持脂肪酶的活性，提高了后阶段的反应准确度。

技术领域：

本发明涉及一种医疗检测试剂的技术领域，具体地说，涉及一种脂肪酶试剂盒及其制备方法。

背景技术：

脂肪酶(lipase，Lip)又称三酰甘油水解酶，是能水解长链脂肪酸三酰甘油的一类酶的总称。人体脂肪酶的主要合成部位在胰腺腺泡，此类脂肪酶又称胰脂肪酶，是血清脂肪酶的主要来源。另外，一些消化器官如胃、十二指肠、食道以及白细胞、脂肪组织、肺、血管内皮也可分泌少量脂肪酶，并进入血液。血清脂肪酶活性测定可用于胰腺疾病诊断，特别是在急性胰腺炎。急性胰腺炎患者与非急性胰腺炎患者及正常人血清脂肪酶水平差异较大，脂肪酶与淀粉酶相比，在急性胰腺炎的诊断上具有更好的敏感性和特异性。

现有脂肪酶的检测常使用脂肪酶试剂盒，例如申请号为CN201811635803.9的发明专利公开了一种脂肪酶检测试剂盒及生产工艺，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，试剂R1包括如下成分：试剂R2包括如下成分：该脂肪酶检测试剂盒即开即用。脂肪酶的原理是：1,2-邻-二月桂基-消旋-甘油-3-戊二酸(6’-甲基试卤灵)酯在脂肪酶的作用下水解生成1,2-邻-二月桂基-消旋-甘油和戊二酸(6’-甲基试卤灵)酯。其中戊二酸(6’-甲基试卤灵)酯在脂肪酶的进一步作用下水解生成戊二酸和甲基试卤灵，甲基试卤灵在溶液中呈现出红色。在波长570nm处检测红色的甲基试卤灵生成速率，该生成速率和样本中的脂肪酶活性成正比，通过计算得出样品中的脂肪酶活性。

但是在上述技术方案中，因为检测脂肪酶活性是持续一段时间的，因此在酶解底物一段时间后，由于反应物的生产，会造成酶解反应速度减慢，所以颜色加深程度趋缓，设置在后阶段观察不到反应颜色变化，吸光度改变不明显，因此后面测量数据参考意义小。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是，提供一种持续性灵敏度高，检测精度高，反应一段时间后，能够持续维持脂肪酶的活性，提高了后阶段的反应准确度。

为解决上述技术问题，本发明采用这样一种脂肪酶试剂盒，包括试剂R1、试剂R2和试剂R3，其特征在于，所述试剂R1包括下述原料：

80～120mmol/l酒石酸缓冲溶液(pH为7.0)；

3.0～5.0mmol/l牛磺脱氧胆酸；

0.05-0.08mmol/l苯丁酸；

450～550KU/l共脂肪酶；

10-15mmol/l氯化钙；

2.0-3.0mmol/l脱氧胆酸；

所述试剂R2包括下述原料：

80～120mmol/l酒石酸缓冲溶液(pH为7.0)；

0.5～1.0mmol/l表面活性剂；

0.2～0.8mmol/蛋白变性剂；

2.0-3.0mmol/l乙醚；