[发明专利]一种核酸保存液及其应用、含有该核酸保存液的质控品

权利要求书

1.一种核酸保存液，其特征在于，由BSA、PEG8000、NaN₃和Tricine缓冲液组成；所述核酸保存液中各组分浓度为：

0.03～0.05mg/ml BSA、0.3-1wt％PEG8000、2～8wt‰NaN₃和20～120mM Tricine盐缓冲液。

2.根据权利要求1所述的核酸保存液，其特征在于，所述核酸为人呼吸道病原体的核酸。

3.权利要求1～2任一项所述的核酸保存液在制备用于检测人呼吸道病原体的核酸质控品中的应用。

4.一种用于检测人呼吸道病原体的核酸质控品，其特征在于，包括阳性质控品和阴性质控品；

所述阳性质控品由权利要求1～2任一项所述的核酸保存液和人呼吸道病原体的核酸序列组成；

所述阴性质控品由权利要求1～2任一项所述的核酸保存液和非人呼吸道病原体的核酸序列组成。

5.根据权利要求4所述的核酸质控品，其特征在于，所述人呼吸道病原体核酸序列为人呼吸道病原体的靶基因片段，所述人呼吸道病原体包括甲型流感病毒(FluA)、乙型流感病毒(FluB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、嗜肺军团菌(LP)和人偏肺病毒(hMPV)中的至少一种。

6.根据权利要求4所述的核酸质控品，其特征在于，所述非人呼吸道病原体的核酸序列为β珠蛋白基因、人源性18S基因中的至少一种。

7.权利要求4～6任一项所述的核酸质控品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：阳性质控品的制备：①PCR扩增获得人呼吸道病原体的靶基因片段；②取载体和所述靶基因片段分别进行酶切后，连接，转化感受态细胞，筛选获得人呼吸道病原体靶基因的阳性菌落并测序验证；③将测序结果正确的菌落进行超声诱导，制备假病毒溶液；④提取假病毒溶液的核酸，加入BSA蛋白、PEG8000、NaN3和Tricine，得到阳性质控品；

步骤2：阴性质控品的制备：①PCR扩增得到非人呼吸道病原体核酸序列；②将载体和所述核酸序列分别进行酶切，连接，转化感受态细胞，筛选获得含非所述八项人呼吸道病原体核酸序列的阳性菌落并测序验证；将测序结果正确的菌落进行超声诱导，制备假病毒溶液；④提取得到假病毒溶液的核酸，加入BSA、PEG8000、NaN₃和Tricine，得到阴性质控品。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述人呼吸道病原体核酸序列为人呼吸道病原体的靶基因片段，所述人呼吸道病原体包括甲型流感病毒(FluA)、乙型流感病毒(FluB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、嗜肺军团菌(LP)和人偏肺病毒(hMPV)中的至少一种；所述非人呼吸道病原体的核酸序列为β珠蛋白基因、人源性18S基因中的至少一种。

9.权利要求4～6任一项所述的质控品在制备检测人呼吸道病原体的试剂盒中的应用。