[发明专利]一种犬细小病毒CPV-HuN1703株及其应用

说明书

本发明涉及一种犬细小病毒CPV‑HuN1703株及其应用，其血凝效价与现有分离毒株相当，但增殖能力优于CPV标准株和发明人早先分离的CPV毒株，是良好的灭活疫苗毒株；将其灭活后制备得到的灭活疫苗能够有效刺激接种动物产生有效水平的IgG抗体，应对不同CPV毒株的感染，且抗体产生水平高，对动物的保护性能高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株犬细小病毒CPV-HuN1703株及其应用。

背景技术

近年来，随着人们生活水平的不断提高，宠物已成为人们生活中不可或缺的部分，迅速膨胀的宠物行业给社会发展带来活力的同时也存在诸多亟待解决的问题，例如，犬瘟热、犬细小病毒病、犬冠状病毒病等传染病在世界范围内广泛流行，迅速蔓延，对养犬业造成巨大危害。其中，犬细小病毒病尤为严重，致死率高达 50%～90%，严重危害了养犬业的发展。

犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canine parvovirus , CPV) 感染引起的以呕吐、腹泻、白细胞减少和出血性肠炎为特征的具有高度接触性的急性烈性传染病，犬细小病毒（CPV）病自发现以来一直是危害犬类健康的最严重的传染病之一，尤其对 2～6 月龄的幼犬危害最大，犬细小病毒分布在世界各地，能够感染犬科和鼬科动物，发病率高达 70%-100% , 死亡率高达 50 %。随着我国生活水平的提高，警犬、实验用宠物犬饲养量的增加，犬细小病毒病日益严重，对犬饲养业带来巨大的损失，也严重威胁我国养犬业的发展。

犬细小病毒（Canine Parvovirus，CPV）属于细小病毒科，细小病毒属成员之一，CPV 结构为等轴对称的，近似球状的二十面体，直径约为 18 nm～26 nm，外观为圆形或六边形，没有囊膜。由于 CPV的结构十分紧密，对各类物理化学等刺激具有很强的抵御能力，65 ℃、30min 处理后仍具有感染性；长时间低温环境下，其感染性不会有变化，室温条件下存活时间为 3 个月左右，在粪便中可存活超过半年以上。CPV 感染后，发病快并且死亡率较高，因而预防 CPV 比治疗更有效果，疫苗接种是控制 CPV 爆发和流行的主要方法。幼犬易感染病毒，即使接种了疫苗也会出现感染，因为幼犬体内的母源抗体会干扰疫苗的作用，导致免疫失败，所以许多研究者致力于克服干扰，研究更有效的疫苗。

灭活苗是使用灭活的病毒接种动物，最初的灭活苗是使用 FPV 接种犬，这是因为FPV 与 CPV 同源比例较高，能起到一定的预防效果。后来有研究者将CPV 强毒株灭活，注射犬群免疫，相比较 FPV 灭活苗的免疫效果更理想，在接种后不良反应不明显，安全可靠。CPV 到目前为止只有一个抗原型，即 Thomson 和 Kelly分离到 CPV-2，但是 CPV 存在抗原漂移，其后出现了在宿主范围、血凝性和抗原性上都发生了变化的不同亚型 CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c(a)和 CPV-2c(b)。随着病毒的不断变异，给此病的治疗以及预防带来了新的挑战。

发明专利申请CN201611031801.X公开了一株犬细小病毒毒株CPV-YH，以及所述的犬细小病毒毒株CPV-YH在制备犬细小病毒疫苗、诊断试剂方面的用途；发明人早年也曾参与CPV相关工作的研究，分离得到CPV-NY130615株（卜宾等，“1株犬细小病毒的分离鉴定及其生物学特性研究”，《河南农业科学》，2015,44（18）：121-127，140）。然而，正如专利申请CN201611031801.X所指出的，我国的CPV分离株也存在基因变异现象，通过病毒发生的自然宿主漂移发生时结果是很严重的，因为这种病毒可以通过先天免疫和非适应的宿主群广泛传播。由于具有很快的变异速度，现临床使用的灭活疫苗与弱毒疫苗的免疫效果都不同程度下降，现有疫苗并不能完全满足疾病防控和市场消费需求。

因此，为了更有效地预防控制犬细小病毒病，亟需分离出新的CPV毒株，用于开发新的犬细小病疫苗。

发明内容