[发明专利]一种鉴别冬虫夏草及其商品真伪PCR引物、试剂盒及方法

权利要求书

1.一组鉴别冬虫夏草真伪的PCR引物，引物的核苷酸序列如下所示：

扩增条带出现495bp，则说明是真的冬虫夏草，未出现495bp则说明样品是伪冬虫夏草，扩增条带出现为180bp，则说明是北虫草或蛹虫草；扩增条带出现为397bp，则说明是僵蚕；扩增条带出现为480bp，则说明是金蝉花；扩增条带出现为610bp，则说明是亚香棒虫草；扩增条带出现为154bp，则说明是凉山虫草；扩增条带出现为510bp，则说明是新疆虫草；扩增条带出现为495和180bp，则说明是真的冬虫夏草掺有北虫草。

2.一种鉴别冬虫夏草真伪的PCR试剂盒，其特征在于：该试剂盒含有权利要求1所述的引物。

3.一种鉴别冬虫夏草真伪的PCR方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)从样品中提取DNA；

2)以提取的DNA为模板，用权利要求1所述的引物对进行PCR扩增反应；

3)根据电泳条带的分布情况或添加染料后的情况，确定待测样品中冬虫夏草的真伪；步骤1)提取DNA的步骤为：在样品中加入NaOH溶液裂解30s～1min。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述样品和NaOH的质量比为5mg～1g：0.4g～80g。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述NaOH的工作终浓度为0.5M～5M。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤2)中的PCR扩增反应体系为：

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤2)中PCR扩增反应程序为：94℃预变性4min；94℃变性30s，65℃退火30s，72℃延伸30s，循环35次。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤3)中所述确定待测样品中冬虫夏草的真伪过程为：扩增条带出现495bp，则说明是真的冬虫夏草，未出现495bp则说明样品是伪冬虫夏草。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述确定待测样品中冬虫夏草的真伪过程为：扩增条带出现为180bp，则说明是北虫草或蛹虫草；扩增条带出现为397bp，则说明是僵蚕；扩增条带出现为480bp，则说明是金蝉花；扩增条带出现为610bp，则说明是亚香棒虫草；扩增条带出现为154bp，则说明是凉山虫草；扩增条带出现为510bp，则说明是新疆虫草；扩增条带出现为495和180bp，则说明是真的冬虫夏草掺有北虫草。